液相芯片技术检测耐多药结核分枝杆菌方法研究

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结核分枝杆菌耐药性的检测在预防和治疗结核病过程中具有十分重要的意义。从我国国情出发,需要建立一种快速有效、成本低廉的耐多药结核分枝杆菌检测方法。本文设计了含有耐药突变基因的质粒,模拟耐药结核杆菌的不同基因突变类型,将液相芯片技术与等位基因特异性引物延伸反应相结合,对耐多药结核分枝杆菌的检测方法进行研究。确定了方法的最佳反应体系,可以同时对多个突变基因进行检测,各基因位点之间不存在信号干扰,最低检测浓度可达1ng/mL;重复性实验表明,对不同基因突变形式检测的变异系数(CV)为6.72%-12.77%。本研究建立的耐多药结核杆菌的检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快、价格低廉、高通量等特点,极具临床应用潜力。
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