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碳酸酐酶(EC 4.2.1.1)是一种广泛存在的金属酶,催化HCO3-和CO2的之间的转化,是已知的催化速率最快的酶之一。许多海藻中都含有碳酸酐酶,有的碳酸酐酶只存在于细胞的内部,也有的碳酸酐酶存在于细胞的表面。而且,碳酸酐酶是一种诱导酶,碳酸酐酶活性的大小依赖于周围生活的环境。许多环境因子都会影响球等鞭金藻胞外碳酸酐酶活性的表达。采用不同的培养条件对球等鞭金藻进行培养,测定其胞外碳酸酐酶活性。本文主要研究了环境因子(CO2、pH、HCO3-、N源、PO43-、Zn2+)对球等鞭金藻胞外碳酸酐酶活性的影响,最后选取3个环境因子(NO3-、PO43-、Zn2+)进行均匀实验设计,来研究这3个因子对球等鞭金藻胞外碳酸酐酶活性的交互影响。实验结果表明,(1)球等鞭金藻具有基本的胞外碳酸酐酶活性,且随着细胞密度的升高而升高,另外测得球等鞭金藻的pH补偿点为9.86,表明其具有利用HCO3-的能力。(2)环境因子对胞外碳酸酐酶活性表达的影响:高的CO2浓度对胞外碳酸酐酶的表达具有抑制作用,且CO2浓度越高影响越显著;碱性pH值下的胞外碳酸酐酶活性高于酸性pH值下的,pH从6.5升高到9.0时,球等鞭金藻的胞外碳酸酐酶活性明显的增加,并在pH 8.5时,胞外碳酸酐酶活性达到最大;添加HCO3-可以提高胞外碳酸酐酶的活性,HCO3-浓度为2.0mmol/L酶活性最高;适宜的N源为2.0mmol/L的NaNO3、PO43-浓度为0.5mmol/L、Zn2+浓度为10μmol/L 。(3)均匀实验结果表明,最优的实验方案为:NaNO3 (2.8mmol/L)、 NaH2PO4(0.2mmol/L)、ZnSO4(6μmol /L),其他条件均为为HCO3-浓度为2.0mmol/L、pH8.5、温度为23士1℃、光强4000lx、,此条件下球等鞭金藻细胞密度和胞外碳酸酐酶活性最高。