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铜作为动物生长发育必需的微量元素; 分布于体内多种组织和器官; 参与动物体内多种生命活动及各种酶的组成;对动物体正常生长代谢与生命活动有着非常重要的影响。本试验以绵羊为动物模型;探究添加不同浓度的日粮铜对绵羊铜摄入水平、生长指标、体内生长激素水平及生长活性多肽和生长轴中枢调控相关基因 mRNA 相对表达量的影响;从而在不同层面上剖析不同日粮铜水平对绵羊生长激素释放调节多肽的影响;为完善高铜促生长机制提供理论依据。 试验设计为单因子三水平;选取体况相近的绵羊15只并采用完全随机化的方式平均分为3组;每组的重复数为5;每个重复有1只羊;分别饲喂3种不同的日粮。即Cu0组为饲喂基础日粮(无额外铜添加)的对照组;Cu10组与Cu25组为试验组;即在以Cu0组饲喂日粮的基础上再分别添加10、25mg Cu/kg DM。 1、日粮铜水平对绵羊表观铜摄入量及生长性能的影响 Cu10组在试验期间的日采食量显著高于Cu0组与Cu25组(P<0.05);Cu 25组的日采食量最低且显著低于Cu 10组与Cu0组(P<0.05); ;三个组的平均日增重比较可以看出Cu10组有较高平均日增重且在60d的试验期中有最大的增重效果;但各组之间差异不显著(P>0.05)。可以看出绵羊的日增重与采食量随着铜添加量的升高呈现先增加后下降的趋势。 2、日粮铜水平对绵羊血清抗氧化酶活性及激素水平的影响 ①Cu 25组的总抗氧化能力(T-AOC)水平显著高于Cu 0组与Cu 10组(P<0.05);Cu 10组T-AOC水平略高于Cu 0组;但差异不显著(P>0.05)。铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)活性Cu 25组显著高于Cu 0组和Cu 10组(P<0.05);且Cu 10组高于Cu 0组但差异不显著(P>0.05)。铜蓝蛋白(CP)的变化趋势同 Cu/Zn-SOD。结果表明:当日粮铜浓度水平的增加;血清内抗氧化指标的水平呈现上升趋势;并且上升趋势在Cu 10组到Cu 25组的过程中尤为显著。 ②血清生长激素(GH)和胰岛素样生长因子(IGF-1)含量均是Cu 10组含量显著高于Cu 0组与Cu 25组(P<0.05);且Cu 0组与Cu 25组血清中GH与IGF-1的含量差异不显著(P>0.05)。结果表明:在日粮添加10 mg/kg铜使血清中的 GH、IGF-1 含量达到最大值;并且随着日粮铜浓度水平的升高呈现先上升后下降趋势;日粮中添加过多的铜(25mg/kg)较对照组相比血清GH、IGF-1含量无显著差异。 3、日粮铜水平对绵羊组织铜含量及生长活性多肽的影响 ①血清中铜的含量在三个处理组之间差异不显著(P<0.05);皱胃与脑铜含量随着铜浓度的升高呈现升高趋势;Cu 25组显著高于Cu 0组与Cu 10组(P<0.05);但Cu 0组与Cu 10组间差异不显著(P>0.05)。 ②中脑黑质中DA含量Cu 10组最高;Cu 25组略有下降;但二者均显著高于Cu 0组(P<0.05)。试验结果表明:随着日粮铜水平的增加绵羊中脑黑质DA含量呈现先升高再下降的趋势;其中Cu 0组到Cu 10组的中脑黑质中DA含量上升明显;而Cu 10组到Cu 25组的中脑黑质中DA含量下降不明显。 ③随着日粮铜浓度水平的升高;皱胃中胃饥饿素(Ghrelin)的含量呈先升高再下降趋势;Cu 10组的含量最高且显著高于Cu 0组与Cu 25组(P<0.05); Cu 25组的含量最低但与Cu 0组比较差异不显著(P>0.05)。绵羊皱胃中Ghrelin mRNA的相对表达量随日粮铜浓度水平的升高Cu 10组达到最高;Cu 25组显著下降;但二者均显著的高于Cu 0组(P<0.05)。结果表明:随着铜水平的升高皱胃中 Ghrelin 的含量以及 mRNA 的表达量均呈现先升高后下降的趋势;且随着浓度升高;加铜组绵羊皱胃中Ghrelin mRNA的表达量均高于未加铜组。 4、日粮铜水平对绵羊生长轴相关基因 mRNA相对表达量的影响 绵羊下丘脑生长激素释放激素(GHRH) mRNA 相对表达量随着日粮添加铜水平的升高呈现先上升后下降的趋势;在Cu 10组时达到最大值且显著高于Cu 0组与Cu 25组(P<0.05);Cu 25组与Cu 0组相对表达量差异不显著(P>0.05);下丘脑生长抑素(SS)的mRNA相对表达量随日粮铜水平的增大呈现出下降的趋势;Cu 10组下降幅度最大;显著低于Cu 0组(P<0.05);Cu 25组与Cu 10组相比表达量虽有下降但差异不显著(P>0.05);垂体GH的mRNA相对表达量随日粮铜水平的上升呈现先升后降的趋势;在Cu 10组的相对表达量最大且显著高于其他两组(P<0.05);Cu 25组的相对表达量最小且与Cu 0组相比有显著的下降趋势(P<0.05)。 综上所述: 1、在日粮中添加 10mg/kg·DM 硫酸铜在绵羊生长性能最佳;且在日粮中添加铜能提高血铜和组织铜含量;能有效提高血清GH;IGF-I的激素水平。 2、在日粮中添加铜可以提高中脑黑质DA的含量;提高皱胃中Ghrelin mRNA表达量及蛋白含量;可以促进下丘脑GHRH的分泌而抑制了SS的分泌;从而起到了促生长的作用。