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目的:研究bcl-2基因重排与微卫星不稳定性在B细胞非霍奇金淋巴瘤发生发展中的作用,以及bcl-2基因重排与微卫星不稳定性和杂合性缺失之间的关系。
方法:采用巢式PCR方法对37例B细胞非霍奇金淋巴瘤bcl-2/IgH基因重排进行检测,PCR-SSCP方法检测与bcl-2基因相关的微卫星标记D18S64、D18S61、D14S65的MSI和LOH的情况。采用DNA抽提试剂盒提取石蜡包埋组织基因组DNA、全血基因组DNA-PCR扩增-变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳-银染法-全自动凝胶成像系统对样本进行MSI和LOH分析。
结果:37例B细胞非霍奇会淋巴瘤中,bcl-2/IgH基因重排阳性率为24.3%(9/37),其中22例弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中检测到7例(31.8%)发生重排,10例套细胞淋巴瘤(MCL)中检测到2例(20%)发生重排。MSI的总阳率为40.5%(15/37),LOH的总阳性率为35.1%(13/37),各位点MSI、LOH频率分别介于16.2%-29.7%和16.2%-27%。分析不同微卫星位点MSI/LOH与bcl-2基因重排的相关性可见:D18S61和D14S65位点MSI阳性组的bcl-2基因重排阳性率均高于MSI阴性组(P<0.05),而D18S64位点则与之相反(P>0.05);D18S6l位点LOH阳性组的bcl-2基因重排阳性率明显高于LOH阴性组,P值小于0.05,而D18S64和D14S65位点与之相反(P>05)。
结论:1.bcl-2/IgH基因重排是滤泡性淋巴瘤的一种常见的分子生物学改变,但在其他类型的B-NHL中可能并不是普遍的现象;2.套细胞淋巴瘤中检测到bcl-2/IgH基因重排,目前国内外未见相关报道,有待于进一步的研究;3.B-NHL中存MSI和LOH,提示MSI和LOH可能参与B-NHL的发生、发展。4.D18S641和D14S65可能是与bcl-2基因关系较为密切的微卫星位点。