液质联用技术,综合了液相和质谱的优势,是一种强有力的分析工具,在药物分析、代谢组学等诸多领域有着广泛的应用。其中,高分辨质谱(如QTOF、LTQ Orbitrap)适合非靶标性的定性分析;而低分辨质谱仪(如QQQ、QTRAP)的MRM扫描模式适合靶标性的定量分析。本实验针对两种不同类型质谱的特点,分别将其应用于内源性代谢产物的定性和定量研究。1.运用LC-QTOF-MS/MS技术对血清磷脂进行非靶标性定性研究近年来,随着质谱技术的飞速发展,磷脂组学也取得了较大的进展。然而,目前已发现的磷脂数量十分有限,且鲜有关于动物模型选择的研究。本实验通过对质谱条件和色谱条件的充分优化,利用LC-QTOF-MS/MS技术建立了一种非靶标性分析血清磷脂的液质联用方法,首次将其应用于人及四个不同种属啮齿类动物血清中的磷脂类化合物的全面表征。最终从健康人血清中共鉴定出了217个磷脂类化合物,并且发现了大鼠血清磷脂的分布与人最为接近,对磷脂组学研究中动物模型的选择有一定的借鉴意义。2.运用LC-QTRAP-MS/MS技术与MRM扫描模式对糖尿病小鼠血浆、尿液和粪便中的胆汁酸进行靶标性定量研究研究证实,2型糖尿病的发生伴随着胆汁酸谱的显著改变。然而大部分研究仅关注了几种主要胆汁酸,或者专注于胆汁酸的分析方法,缺乏对2型糖尿病动物模型或患者胆汁酸谱的系统研究。本实验利用LC-QTRAP-MS/MS技术与MRM扫描模式,建立了可靶标性定量25种胆汁酸的分析方法,并以公认的2型糖尿病动物模型db/db小鼠及其野生型对照小鼠为实验对象,首次系统研究了其血浆、尿液和粪便的胆汁酸谱。通过多元统计分析,本实验证实两组小鼠的胆汁酸谱在统计学上有显著性差异,并发现了一系列潜在的2型糖尿病相关的胆汁酸类生物标志物,对2型糖尿病的早期诊断和预防有一定的参考价值。