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本研究建立了猪、牛、羊可食性组织及奶中克拉维酸残留检测的液相色谱-串联质谱法。 1g组织样品用pH6.05乙酸铵和乙腈混提后,经二氯甲烷反提净化,取水相定容到4mL,正己烷除脂后上机检测。2g奶样品经乙醇沉淀蛋白,转入鸡心瓶中旋至0.5mL左右,pH6乙酸铵定容,净化后检测。以乙腈和0.1%甲酸水作为流动相,梯度洗脱,经Luna5u C8色谱柱分离,流速为0.25mL/min,进样量为5μL。采用电喷雾电离,多反应监测负离子模式对克拉维酸进行LC-MS/MS定量分析。 本试验用空白基质匹配标准溶液法制备标准曲线。克拉维酸在各种组织中相应的线性范围内(肌肉、脂肪、肝脏、肾脏中均为5~500μg/L;奶中为10-400μg/L)线性良好,相关系数均达到0.99以上。 克拉维酸在猪、牛、羊可食性组织(肌肉、脂肪、肝脏、肾脏)及奶中的检测限(LOD)均为10μg/kg,定量限(LOQ)均为20μg/kg。 在猪不同组织样品中添加LOQ、1/2MRL、MRL、2MRL四个水平,克拉维酸的回收率、批内变异系数、批间变异系数分别为:肌肉80.40%~91.23%、1.18%~6.26%、3.30%~3.36%;脂肪82.74%~88.90%、1.18%~3.92%、2.3l%~3.5%;肝脏79.61%~91.34%、1.01%~7.58%、3.75%~5.64%;肾脏75.11%~85.34%、0.97%~6.21%、4.38%~5.53%。 在牛不同组织样品中添加LOQ、1/2MRL、MRL、2MRL四个水平,克拉维酸的回收率、批内变异系数、批间变异系数分别为:肌肉80.25%~87.12%、0.88%~4.38%、1.89%~4.06%;脂肪80.55%~82.50%、0.76%~4.39%、2.35%~4.06%;肝脏78.69%~86.64%、1.06%~5.45%、2.83%~4.12%;肾脏78.82%~85.78%、1.34%~8.01%、3.03%~5.42%;牛奶78.34%~101.55%、1.20%~9.49%、4.75%~8.77%。 在羊不同组织样品中添加LOQ、1/2MRL、MRL、2MRL四个水平,克拉维酸的回收率、批内变异系数、批间变异系数分别为:肌肉80.88%~88.30%、1.11%~6.16%、3.74%~4.19%;脂肪80.35%~89.26%、1.45%~4.39%、2.45%~4.82%;肝脏79.35%~88.11%、1.27%~7.60%、3.53%~5.77%;肾脏76.69%~85.86%、1.69%~8.74%、4.72%~7.19%;羊奶76.13%~90.07%、1.45%~7.45%、5.60%~7.43%。 结果表明,本研究建立的方法前处理过程简单快捷,检测限低,重现性好,准确度与精密度均可满足克拉维酸在猪、牛、羊可食性组织中残留检测的残留检测的要求。