功能化载药纤维微球的制备及其肿瘤局部化疗应用

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癌症患者高死亡率的主要原因是肿瘤细胞具有转移和侵袭性。而传统的全身化疗由于药物缺乏特异性和突释行为产生了较强的副作用。因此,构建合适的药物载体对原位肿瘤细胞进行靶向锚固以阻止其发生转移和侵袭,并局部给药以高效杀死癌细胞是提高肿瘤治愈率的关键所在。具有较高药物负载能力的多孔微球经合适表面修饰后可实现长期药物控释和靶向治疗目的,同时其微米尺度为锚固捕获肿瘤细胞提供了可能。通过电喷雾含有均质化得到的静电纺短纤维的分散液可经济高效制备多孔微球,其已广泛用于组织修复领域,但在肿瘤治疗领域却鲜有报道。基于此,本论文拟构建造影剂钆(Gd)和靶向试剂分子透明质酸(HA)修饰的多功能微球,并加载化疗药物阿霉素(DOX),用于原位肿瘤模型的定向锚定、治疗和MR成像研究。首先,我们将聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)静电纺丝液通过静电纺丝制备PLGA纤维膜,再均质化后得到PLGA短纤维(SFs);在其表面偶联聚乙烯亚胺(PEI)修饰的二乙烯三胺五乙酸二酐(DTPA),进而螯合Gd3+和修饰靶向试剂HA获得功能化短纤维(PGH SFs);然后将PGH SFs分散在含明胶的水溶液中,并添加抗癌药物DOX,混合后进行电喷雾和交联以获得功能化载药纤维微球(DOX@PGH);最后,采用多种技术对微球的物化特性进行表征,并通过体内外实验评估微球的生物性能以及对肿瘤细胞的靶向锚固和治疗效果。一方面,造影剂Gd的螯合赋予微球MR成像功能,HA可与肿瘤的高表达受体CD44结合,赋予微球对肿瘤细胞的靶向锚固功能;另一方面,在肿瘤细胞被靶向锚固的前提下,微球释放的DOX能精准作用于肿瘤细胞,发挥更强的化疗效果。研究结果表明,DOX@PGH的平均直径为118.8μm,具有较好的DOX缓释性能(120 h内可释放52.2%的DOX)、较高的r1弛豫性能和良好的结构稳定性。体外细胞和体内动物实验证明,由受体介导的多功能纤维微球(PGH)能够锚固小鼠乳腺癌细胞(4T1),对肿瘤细胞具有一定的抗转移作用;在HA靶向机制引导下可以实现更精确的DOX递送,在抑制转移的同时加速4T1细胞的死亡;在MR成像引导下,观察到DOX@PGH能够长时间靶向锚固在肿瘤部位,进一步证明了微球具有抗肿瘤转移效果。总之,本研究所开发的DOX@PGH作为药物控释体系,在MR成像引导下通过局部集中治疗能够实现对原发肿瘤模型的靶向锚固以及长效化疗,进而达到更好的抗肿瘤疗效。该研究结果为开发同时具有抗肿瘤转移及肿瘤治疗双重作用的药物控释体系提供新思路。
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