【摘 要】
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miRNA是一类长约18~22个核苷酸的非编码小分子RNA,在癌症筛查和预后判断方面潜力巨大。但是miRNA的同源性很高,体内表达量不高,为miRNA的检测带来许多困难。且现在常用的miRNA检测方法一般都需要复杂的预处理步骤、昂贵的光学仪器以及荧光试剂。电化学传感技术因具有灵敏度高、简单便携的优点,在临床诊断、药物分析等方面被高度重视。多孔材料由于其具有的大的比表面积、高透过性和高吸附性,被广泛
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miRNA是一类长约18~22个核苷酸的非编码小分子RNA,在癌症筛查和预后判断方面潜力巨大。但是miRNA的同源性很高,体内表达量不高,为miRNA的检测带来许多困难。且现在常用的miRNA检测方法一般都需要复杂的预处理步骤、昂贵的光学仪器以及荧光试剂。电化学传感技术因具有灵敏度高、简单便携的优点,在临床诊断、药物分析等方面被高度重视。多孔材料由于其具有的大的比表面积、高透过性和高吸附性,被广泛应用在催化、吸附和分离等多个领域。本文旨在以酵母细胞为模板,采用生物矿化自组装合成技术,绿色仿生合成了多种酵母介孔材料,并作为电极传感活性材料,组装电化学传感电极,对癌症特征的miRNA进行电化学传感检测,不需要进行扩增和链反应,不需要使用荧光试剂,为纳米材料技术在生物医学领域的应用提供新思路。本论文的主要内容主要包括以下几个方面:1.我们利用酵母细胞为模板结构导向剂,仿生制备了酵母介孔铬和酵母介孔铬钛,研究了不同合成条件(培养基成分、离子浓度、培养时间、水解促进剂种类等)下对材料电化学传感性能的影响,筛选出最佳制备条件。此外,由于n-p异质结的存在,酵母介孔铬钛的电化学传感性能要优于酵母介孔铬的电化学传感性能。酵母介孔铬钛电极在检测50~150 nM/L的miR-1290具有线性,其检测限为29 pM/L。2.以上述选出的最佳制备条件合成制备了酵母介孔铁和酵母介孔铁钛,并对酵母介孔铁钛的合成机理进行了研究。电化学测试表明,由于Ti4+取代了Fe3+,形成了大量氧空位,酵母介孔铁钛的电化学传感性能要优于酵母介孔铁的电化学传感性能。3.以上述选出的最佳制备条件合成制备了酵母介孔钛和酵母介孔钛硅,对miRNA完美匹配和错配溶液进行了电化学研究。结果表明,电化学检测仅在检测miRNA完美匹配溶液时出现氧化峰,而所有错配溶液均未检测到氧化峰,该传感检测技术可用于miRNA的特异性检测。通过修饰酵母介孔材料,可有利于miRNAs在低电位的检测,并避免高电位对电极的破坏,延长电极使用寿命。
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