温补心肾法对CHF大鼠心肌舒缩功能及心室重构的影响

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mxyyd
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目的:观察温补心肾法对慢性心力衰竭(CHF)大鼠肌浆网钙泵(SERCA2a)、雷尼丁受体2(RYR2)mRNA及其蛋白表达量水平,同时检测血流动力学状态,探讨温补心肾法对CHF大鼠心肌舒缩功能的影响;观察温补心肾法对CHF大鼠心肌肥大信号通路钙调神经磷酸酶(CaN)以及活化T细胞核因子3(NFAT3)的水平,同时检测左室重量指数(LVMI),血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)以及内皮素-1(ET-1)水平,探讨温补心肾法对CHF大鼠心室重构的影响;研究温补心肾法防治CHF可能的作用机制,为临床治疗提供新的思路。   方法:将SD大鼠随机分为六组即空白对照组、模型组、独参汤组、芪附汤组、加减真武汤组和缬沙坦组。采用LAD(结扎左冠状动脉前降支)法制备慢性心衰大鼠模型,空白对照组只穿线不结扎。12周后进行灌胃治疗,每天给药一次。连续给药4周后,测定大鼠血流动力学参数和左室重量指数,并采用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定血浆AngⅡ、ET-1、CaN含量,采用Westernbolt法检测SERCA2a、RYR2、NFAT3蛋白表达量,采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法测定SERCA2a、RYR2mRNA水平,同时在光镜下观察心肌组织病理形态学的变化,探讨温补心肾法治疗慢性心衰可能的作用机制。   结果:   1.病理切片HE染色的比较:与空白对照组比较,模型组心肌细胞变大,心肌纤维排列疏松,肌原纤维断裂、分离,间质成纤维细胞增生致心肌纤维化。经治疗后,与模型组相比,各组均有不同程度改善,其中缬沙坦组、真武汤组改善比较明显,心肌细胞大小尚均匀,心肌纤维排列基本整齐,间质成纤维细胞减少,血管周围无明显纤维化;独参汤组、芪附汤组亦有轻度改善,心肌细胞稍大,纤维排列改善,纤维化程度减轻,血管周围轻度变性。   2.大鼠血流动力学的比较:与空白对照组比较,模型组血流动力学参数左室舒张末期压(LVEDP)明显升高,左室收缩压(LVSP)、左室上升最大速率(+LVdp/dtmax)及左室下降最大速率(-LVdp/dtmax)绝对值均降低(P<0.05)。与模型组比较,缬沙坦组能降低LVEDP水平、升高+LVdp/dtmax及-LVdp/dtmax水平(P<0.05);真武汤组能降低LVEDP水平,升高LVSP、+LVdp/dtmax及-LVdp/dtmax水平(P<0.05);芪附汤、独参汤组均能升高LVSP、+LVdp/dtmax及-LVdp/dtmax水平(P<0.05)。各个组间HR值差异均无统计学意义(P>0.05)。   3.大鼠LVMI的比较:与空白对照组相比,模型组大鼠LVMI明显升高(P<0.05);各用药组与模型组比较,缬沙坦组、加减真武汤组LVMI均明显降低(P<0.05),独参汤组、芪附汤组大鼠LVMI差异不显著(P>0.05)。   4.神经内分泌因子的比较:与空白对照组比较,模型组大鼠血浆中AngⅡ、ET-1含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,缬沙坦组、加减真武汤组、独参汤组、芪附汤组中大鼠血浆AngⅡ、ET-1水平均显著降低(P<0.01)。   5.钙循环中钙调控蛋白SERCA2a、RYR2mRNA的比较:与空白对照组比较,模型组大鼠心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2mRNA水平均下降(P<0.05);与模型组比较,仅有加减真武汤组心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2mRNA水平升高(P<0.05)。   6.钙循环中钙调控蛋白SERCA2a、RYR2蛋白相对表达量的比较:与空白对照组比较,模型组大鼠心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2蛋白相对表达量均下降(P<0.05);与模型组比较,仅有加减真武汤组心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2蛋白相对表达量升高(P<0.05)。   7.心肌肥厚的信号通路CaN-NFAT3的比较:与空白对照组比较,模型组大鼠血浆CaN活性、心肌细胞NFAT3蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05)。各治疗组与模型组比较,缬沙坦组、加减真武汤组、独参汤组、芪附汤组大鼠血浆CaN活性均明显下降(P<0.05);而仅有缬沙坦组、加减真武汤组心肌细胞NFAT3蛋白质相对表达量下降(P<0.05)。   结论:温补心肾法能够改善CHF大鼠血流动力学状态,同时可以升高CHF大鼠的心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2mRNA及其蛋白相对表达量,提示温补心肾法能够改善钙循环,提高心肌舒缩功能;温补心肾法能够降低LVMI、血浆AngⅡ、血浆ET-1水平,同时能够下调CaN、NFAT3水平,提示温补心肾法能够抑制心肌肥厚信号通路,改善心室重构。提示温补心肾法能够提高CHF大鼠心肌舒缩功能,同时具有改善心室重构的作用。
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