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研究背景与目的:
获得性免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficieney syndrome,AIDS,简称艾滋病)是人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染机体后,导致CD4+T淋巴细胞耗竭、细胞免疫功能降低而引起的综合征。目前尚未发现根治HIV感染的特效药物,临床强调的是规范抗逆转录病毒治疗和综合治疗。由于药物的不良反应和耐药性等原因药物并不能完全控制病毒的复制,随着病毒数量的上升和对免疫系统的不断破坏,机体抗感染能力显著下降,发生机会性感染或肿瘤而死亡。CD4+T细胞减少是感染者免疫功能缺陷的重要原因和标志,事实上HIV感染后对人体免疫系统的损害是广泛和复杂的,因此在抑制病毒增殖的同时能够恢复人体免疫系统也是治疗相关病症的重要和关键步骤。
我国自发现艾滋病以来就开展了中医药治疗艾滋病的研究,总结出了多个有效的处方,正在进行深入研究。其中“唐草片”是首个国家食品药品监督管理局批准用于治疗艾滋病的纯中药新药。其主要成分包含老鹳草、金银花、柴胡、黄芪、甘草、鸡血藤、白花蛇舌草、银杏叶等,组方意在“清热解毒、活血化瘀、祛邪扶正等”。临床研究结果显示,患者长期服用该药能够增强自身抗病毒能力,提高生活质量,延缓病情进展同时能够减少化学药物的不良反应。唐草片处方中其中含有多种能够调节免疫功能的成分,因此本研究观察唐草片对氢化可的松造成的免疫抑制小鼠是否有稳定和恢复免疫功能的作用。
研究方法:
BALB/C小鼠60只,雄性,将60只动物随机分6组(正常对照组、模型对照组、阳性对照组、唐草片高、中、低剂量组)。所有动物按照0.1ml/10g/天的剂量灌胃3周,正常对照组、模型对照组都灌服纯净水,唐草片组低(0.5g/kg)、中(1.0g/kg)、高(2.0g/kg)三个剂量灌服不同浓度的唐草片,阳性对照组则灌服香菇菌多糖片。两周后,除正常对照组外,其余5组均用氢化可的松(25mg/kg/天)造模,连续腹腔注射7天后。测定以下数值,眼眶取血检测其外周血Lym和wbc计数;利用紫外分光光度计测定血液中的碳廓清指数;称量小鼠体重,以及胸腺和脾脏的湿重,计算胸腺指数、脾脏指数;利用免疫组化测定肠粘膜中IgA、CD4+和CD8+T细胞表达量;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测鼠血清中IL-2、INF-γ水平。
结果:
1外周血Lym、wbc计数:氢化可的松模型组与正常组有显著性差异(P<0.05),说明小鼠免疫抑制模型成功。唐草片中、高剂量组、阳性对照组与模型组均有差异性(P<0.05),都能提高Lym以及wbc的数量。
2碳廓清指数、胸腺指数和脾脏指数:在碳廓清指数的测定中,模型组与正常组有差异性(P<0.05),说明HY使吞噬细胞的吞噬功能降低;唐草片中剂量组与模型组有差异性(P<0.05),说明唐草片能够提高吞噬细胞的功能;胸腺指数与脾脏指数,模型组与正常组之间有差异性(P<0.05),说明HY能够抑制免疫器官中细胞的数量和重量:唐草片中剂量组和香菇菌多糖组与模型组之间有差异性(P<0.05),说明唐草片中剂量组能够提高免疫器官中淋巴细胞的数量。
3血清中IL-2、INF-γ的含量:模型对照组与正常组有差异性(P<0.05),说明HY可以明显抑制血清中IL-2、INF-γ的表达量;唐草片中剂量、香菇菌多糖组与模型组有差异性(P<0.05),说明唐草片中剂量组和香菇菌多糖组均能够增加免疫抑制小鼠的外周血中IL-2、INF-γ的分泌。
4肠道粘膜中IgA、CD4+和CD8+T细胞的表达:模型组与正常组之间有差异性(P<0.05),说明HY能够抑制肠道粘膜中IgA、CD4+和CD8+T细胞亚群的表达量;唐草片中、高剂量、香菇菌多糖组与模型组之间有差异性P<0.05,说明唐草片能够提高免疫抑制小鼠肠道免疫功能。
结论:
1唐草片能够提高氢化可的松免疫抑制小鼠的细胞免疫功能;
2唐草片能够提高氢化可的松免疫抑制小鼠肠道的屏障作用和免疫功能。