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目的:以小鼠中脑多巴胺能神经元细胞(MN9D)为模型,探讨雷帕霉素在调控锰诱导MN9D细胞凋亡中的作用及可能机制,探讨mTOR信号通路在雷帕霉素调控锰诱导MN9D细胞凋亡中作用及其可能机制,为防治职业人群锰中毒提供研究基础。方法:1.MN9D细胞在雷帕霉素(0.1μg/ml)预处理1h后分别暴露1.2和2.4m M锰24h。然后,观察细胞形态、台盼蓝染色计数活细胞数量、Annexin V/PI双染色后用流式细胞仪检测细胞凋亡率、Western blot分析MN9D细胞caspase-3激活程度。2.MN9D细胞在雷帕霉素RAP(0.1μg/ml)/mTOR激动剂MHY(1μM)预处理1h后暴露1.2 m M锰24h。然后,观察细胞形态、台盼蓝染色计数活细胞数量、Annexin V/PI双染色后用流式细胞仪检测细胞凋亡率、western blot分析MN9D细胞caspase-3激活和mTOR相关蛋白变化。结果:1.与对照组相比,锰以浓度依赖的方式诱导MN9D细胞活性下降和形态改变,凋亡率逐渐升高,cleaved-caspase-3蛋白表达量也逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。而与染锰组相比,雷帕霉素预处理能够明显削弱锰诱导的MN9D细胞活性下降和调亡表现,阻滞锰诱导caspase-3激活,差异有统计学意义(P<0.05)。2.与对照组相比,单独染锰组MN9D细胞活性下降和形态改变,凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05);cleaved-caspase-3蛋白表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05);AKT和和S6K1、4E-BP1蛋白磷酸化表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05)。而与染锰组相比,雷帕霉素预处理可以减弱cleaved-caspase-3蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);并且减弱AKT以及S6K1和4E-BP1的蛋白磷酸化表达,差异有统计学意义(P<0.05)。同与染锰组相比,MHY预处理则会加重细胞凋亡,并使cleaved-caspase-3蛋白表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05);S6K1和4E-BP1的蛋白表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05);AKT蛋白表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.雷帕霉素具有明显削弱锰诱导MN9D细胞调亡的作用。2.锰可通过mTOR信号通路诱导MN9D细胞凋亡。3.雷帕霉素可通过mTOR信号通路抵抗锰诱导MN9D细胞凋亡。