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呼吸道合胞病毒(RSV)是婴幼儿下呼吸道感染的最重要病原，也是造成老年人和免疫缺陷成人高患病率和死亡率的重要原因。60年代研制的福尔马林灭活的RSV(FI-RSV)免疫幼儿后，不仅没达到预防目的，反而使其自然感染RSV后病情加重，造成80％被免疫者住院，其中2例死亡。目前认为FI-RSV疫苗导致的病情加剧与伴随肺部嗜酸性粒细胞浸润和IL-4、IL-5细胞因子升高的Th2型优势应答、中和抗体水平不足、以及缺乏局部免疫等有关。WHO已将RSV疫苗列为优先发展的疫苗之一，但由于疫苗导致的免疫病理学和安全性问题，目前仍无一例安全有效的疫苗被批准上市。 大量研究发现RSV的G蛋白免疫小鼠后能诱导以IgG1为主的抗体和Th2优势应答，但不能诱导IgG2a、Th1和MHC I限制性CD8~+T细胞应答，这种免疫的不平衡性与该类蛋白疫苗的副作用密切相关。研究发现：在诱导CD4~+T细胞的同时激活CD8~+T细胞可以下调Th2型细胞因子，同时防止嗜酸性粒细胞浸涧，可见CD8~+T细胞不仅在清除RSV，而且在下调Th2型细胞因子应答和控制Th2型优势应答导致的病理反应中均起着重要的作用。 一个理想的、安全有效的RSV疫苗应该能够同时诱导体液免疫(抗体)、细胞免疫(CTLs)和平衡的Th1／Th2应答。本论文所描述的重组融合蛋白G：125-225-F／M2：81-95(G1F／M2)，包括G蛋白的中和抗体表位片段(G：125-225)和RSV-M2蛋白的CD8~+T细胞表位片段(M2：81-95)；其设计目标是发展一个安全有效的RSV疫苗。 首先构建表达质粒并表达纯化融合蛋白G1F／M2：将G1和F／M2：81-95基因片段插入质粒pET-DsbA中构建了原核表达质粒，在E.coli BL21(DE3)中得到表达，采用Ni~+螯合亲和层析法纯化尿素变性的包涵体溶液，梯度透析复性，Western-blot鉴定重组蛋白的RSV特异性，用凝血酶切割DsbA-G1F／M2而得到融合蛋白G1F／M2。 免疫原性研究：将融合蛋白G1F／M2以铝盐为佐剂腹腔注射免疫BALB／c小鼠，或将G1F／M2与佐剂型载体热休克蛋白HSP70L1形成的复合物HSP70L1-G1F／M2(HSP-G1F／M2)皮下注射免疫BALB／c小鼠，均诱导了高滴度的蛋白及RSV特异