【摘 要】
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目的:利用SD大鼠膝骨性关节炎模型,对比观察加味右归丸干预KOA病程后,对KOA大鼠5-HT、5-HT2AR下行易化的影响,并基于5-HT2AR/PKC通路,研究加味右归丸对KOA镇痛作用的机制。材料与方法:动物实验选用2月龄SD大鼠60只,雌雄各半。分别按照随机数字表法分为假手术组、模型组、加味右归丸组、右归丸组、塞来昔布组,共5组,每组12只。模型组、加味右归丸组、右归丸组、塞来昔布组采用改良
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目的:利用SD大鼠膝骨性关节炎模型,对比观察加味右归丸干预KOA病程后,对KOA大鼠5-HT、5-HT2AR下行易化的影响,并基于5-HT2AR/PKC通路,研究加味右归丸对KOA镇痛作用的机制。材料与方法:动物实验选用2月龄SD大鼠60只,雌雄各半。分别按照随机数字表法分为假手术组、模型组、加味右归丸组、右归丸组、塞来昔布组,共5组,每组12只。模型组、加味右归丸组、右归丸组、塞来昔布组采用改良Hulth法建立KOA模型。待手术切口愈合后,每日驱赶各组大鼠奔跑30分钟。驱赶7周后随机抽样确定造模是否成功。确定造模成功后进行药物干预,分别予加味右归丸组、右归丸组、塞来昔布组对应药物药液灌胃,予假手术组及模型组等量蒸馏水灌胃。干预4周后,取各组大鼠血清、膝关节滑膜组织、脊髓背角、背根神经节。将各组大鼠膝关节滑膜组织进行HE染色,在数码显微镜下观察滑膜组织炎症细胞浸润、小血管新生情况,用TB染色观察滑膜组织肥大细胞脱颗粒情况。用ELISA法检测大鼠血清中5-HT含量。用IHC法检测各组滑膜组织、脊髓背角、背根神经节中5-HT2AR表达量。用Western blot法检测各组滑膜组织中5-HT2AR、脊髓背角中PKC表达量。利用SPSS26.0软件统计结果。结果:1.数码显微镜观察:（1）HE染色法观察各组膝关节滑膜组织炎症细胞浸润及小血管新生程度:模型组﹥右归丸组﹥塞来昔布组﹥加味右归丸组﹥假手术组。（2）TB染色观察各组膝关节滑膜组织肥大细胞数量:假手术组=加味右归丸组﹤塞来昔布组﹤右归丸组﹤模型组。肥大细胞脱颗粒程度:模型组﹥右归丸组﹥塞来昔布组﹥加味右归丸组=假手术组。2.各组大鼠血清中5-HT含量:模型组﹥右归丸组﹥塞来昔布组﹥加味右归丸组﹥假手术组,右归丸组与塞来昔布组无统计学差异（P﹥0.05）3.各组脊髓背角中5-HT2AR表达量:模型组﹥右归丸组﹥塞来昔布组﹥加味右归丸组﹥假手术组,加味右归丸组与塞来昔布组无统计学差异（P﹥0.05）,右归丸组与塞来昔布组无统计学差异（P﹥0.05）;各组背根神经节中5-HT2AR表达量:模型组﹥右归丸组﹥塞来昔布组﹥加味右归丸组﹥假手术组,加味右归丸组与塞来昔布组无统计学差异（P﹥0.05）;各组滑膜组织中5-HT2AR表达量:模型组﹥右归丸组﹥塞来昔布组﹥加味右归丸组﹥假手术组,加味右归丸组与右归丸组及塞来昔布组之间无统计学差异（P﹥0.05）。4.各组滑膜组织中5-HT2AR表达量:模型组﹥右归丸组﹥塞来昔布组﹥加味右归丸组﹥假手术组,加味右归丸组与塞来昔布组无统计学差异（P﹥0.05）,右归丸组与塞来昔布组无统计学差异（P﹥0.05）;各组脊髓背角中PKC表达量:模型组﹥右归丸组﹥塞来昔布组﹥加味右归丸组﹥假手术组,加味右归丸组与塞来昔布组无统计学差异（P﹥0.05）,右归丸组与塞来昔布组无统计学差异（P﹥0.05）。结论:1.加味右归丸可减少KOA大鼠滑膜炎性浸润、小血管新生以及肥大细胞数量,且作用强于塞来昔布和右归丸,此外可减少肥大细胞脱颗粒,作用强于右归丸。2.加味右归丸可抑制KOA大鼠5-HT、5-HT2AR下行易化,且效果优于右归丸和塞来昔布。3.加味右归丸可抑制KOA大鼠5-HT2AR/PKC通路表达,且效果优于右归丸和塞来昔布,提示加味右归丸对KOA的镇痛作用可能与抑制5-HT2AR/PKC通路表达有关。
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