荞麦蜂花粉抗前列腺疾病与美白活性成分研究

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荞麦蜂花粉(Buckwheat Bee Pollen)是蜜蜂从荞麦花中采集花粉后,与自身腺体分泌的物质及唾液混合所形成的不规则扁圆形团状物,富含人体所需的多种营养物质。荞麦蜂花粉具有美白、消炎、抗氧化、预防和治疗前列腺疾病等功效,广泛应用于食品、保健品等领域。然而,现阶段针对荞麦蜂花粉各种功效具体的活性成分物质基础的研究还不完善,基于此,本文对荞麦蜂花粉展开了如下研究:1.荞麦蜂花粉抗慢性非细菌性前列腺炎(Chromc Nonbacterial Prostatitis,CNP)的活性研究。荞麦蜂花粉经粉碎、过筛、提取、浓缩后得到醇提物。将荞麦蜂花粉醇提物作用于CNP模型大鼠来检验其抗CNP活性。结果显示荞麦蜂花粉醇提物对CNP模型大鼠具有显著降低其前列腺湿重及指数、血清和前列腺组织匀浆中白介素-8(IL-8)浓度的作用(P<0.01或P<0.05),即具有显著的抗CNP活性。经AB-8大孔树脂柱对荞麦蜂花粉醇提物进行粗分,得到A、B、C、D、E五个粗分组分。进一步对荞麦蜂花粉醇提物各粗分组分抗CNP活性进行研究,结果显示:组分C具有降低CNP模型大鼠前列腺湿重及指数、血清和前列腺组织匀浆中IL-8和白介素-2(IL-2)的浓度以及减少白细胞计数的作用(P<0.01或P<0.05),有显著的抗CNP活性。组分B也具有降低CNP模型大鼠前列腺湿重及指数、组织匀浆中IL-8的浓度以及减少白细胞计数的作用(P<0.05),即组分B有明显的抗CNP活性。但相比之下,荞麦蜂花粉醇提物组分C的总体抗炎症效果更显著。经MCI(Middle Chromatogram Isolated)和ODS(Octadecylsilyl)色谱柱对组分C进行进一步的分离,得到化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ。利用核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)技术对其结构进行鉴定,得出化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为:1,2,3,4,6-五-O-没食子酰葡萄糖、2-O-二没食子酰-1,3,4,6-四-O-没食子酰葡萄糖、葡萄糖上连了9个没食子酰基的物质(九没食子酰葡萄糖)。2.荞麦蜂花粉抗良性前列腺增生(Benign Prostatic Hyperplasia,BPH)活性研究。将荞麦蜂花粉醇提物作用于BPH模型小鼠,结果表明其抗BPH活性没有达到显著性,但存在一定的趋势,可能是由于其成分复杂,其中有效成分的含量不多从而难以达到有效的治疗浓度。进一步对荞麦蜂花粉醇提物各粗分组分抗BPH活性进行研究,结果显示各组分抗BPH活性仍然不显著,但组分D的抗BPH效果稍好,存在一定的趋势。利用MCI和ODS色谱柱对组分D进行进一步的分离,得到化合物Ⅳ和Ⅴ。利用NMR方法鉴定得到化合物Ⅳ为十八碳-9 Z,12 Z,15 Z-三烯酰基-N-乙基甘油醚。初步判定化合物Ⅴ为单甘酯类物质,其具体结构还需要进一步的研究。3.荞麦蜂花粉美白活性研究。利用D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致衰老模型小鼠对荞麦蜂花粉醇提物组分A、B、C、D、E的抗氧化活性进行检测,结果表明:组分B和组分C对D-gal致衰老模型小鼠具有升高其血清超氧化物歧化酶(SOD)的活力,降低肝脏丙二醛(MDA)浓度的作用(P<0.01或P<0.05)。即组分B和组分C有显著的抗氧化活性。荞麦蜂花粉醇提物不同组分对酪氨酸酶活性的抑制实验表明,组分C对酪氨酸酶活性的抑制率最显著,组分B次之,并且在一定范围内,抑制率与样品的浓度呈正相关。经鉴定,组分B为黄酮类物质。对从组分C分离出来的化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ进行酪氨酸酶活性抑制率的测定,结果显示,在浓度为1mg/m L时,其抑制率分别为:60.77%、78.25%、53.64%。
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