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本研究以环草石斛(DendrobiumloddigesiiRolfe.)为材料,探索环草石斛组织培养快速繁殖的技术体系与组培苗移栽技术体系,重点研究了壮苗阶段的培养基的配制和最佳生产技术路线。结果表明:
1)环草石斛组织培养条件:昼夜温25±2℃,光照12h/d,光强20001x左右,pH5.8。
2)外植体以种子为好,其它外植体诱导原球茎难度大,死亡率高。
3)种子萌发最适培养基为:1/2MS+200g/L马铃薯+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L,pH5.5,萌发率达95%以上。
4)继代培养最适合培养基为:1/2MS+200g/L的马铃薯+NAA0.5mg/L,琼脂6.5g/L,蔗糖30g/L,PH值5.8。苗生长情况很好,培养一个月左右,苗成倍增长,苗色青绿。
5)原球茎增殖最适条件:培养室内的温度在20℃~25℃,1/2MS+200g/L的马铃薯+NAA0.5mg/L,琼脂6.5g/L,蔗糖30g/L,pH值5.8,原球茎应和小苗同时转接培养。培养2个月后,增殖系数6~10。
6)壮苗培养:最优处理组合是WM+马铃薯200g/L+激素NAA2.0mg/L,PH值5.8,成本最低,壮苗效果最好。培养4个月后株高增长了4.9cm,茎粗增长了0.14cm,叶片数增长了1.5,叶面积增长了1.9cm2,根数增长了4.6,根长增长了3.8cm,丛生增长了1.5,鲜重增长了1.3g
7)组培苗移栽环境:能进行人工光、温、水控制的塑料薄膜大棚内为环草石斛组培苗移栽最适合的环境。
8)组培苗移栽基质:下面一层是约10cm厚的碎石,在碎石上面是腐殖土+锯末+珍珠岩(5:1:1),最上面是一层新鲜苔藓。组培苗移栽8个月后,存活率在95%以上。
9)组培苗移栽光照强度:使用遮阳网(半遮阴)为最适合。