人类呼吸道合胞病毒(hRSV)是引起全世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的主要病原,是严重威胁婴幼儿健康的重要因素之一。然而目前RSV仍没有安全有效的抗RSV疫苗,而唯一经美国FDA批准上市的预防性的抗RSV药物是一株抗RSV融合蛋白F的人源化鼠单克隆抗体——帕利珠单抗(商品名Synagis),具有阻止RSV向下呼吸道扩散的功效。但帕利珠单抗保护的人群有限制性、不能用于RSV感染的治疗、且需长期注射,因此亟需开发功效更强、价格更低的中和单抗,为更多的患儿带来健康的福音。　　 前期研究显示,融合蛋白F、糖蛋白G是能够激发机体产生保护性抗体的病毒主要抗原,且其作为亚单位疫苗的开发已有多年。但由于G蛋白在RSV的A、B两个亚型中的抗原变异性较大,而F蛋白高度保守,其诱导产生的中和抗体可同时抑制两个亚型的病毒感染。因此本研究以F蛋白作为中和抗体以及疫苗研究的对象。　　 本研究旨在建立以荧光检测仪代替流式细胞仪进行中和活性检测的模型,并建立起快速、高通量的中和单抗筛选平台系统。通过筛选合适的RSV病毒敏感细胞株,比较荧光检测仪与流式细胞仪在中和活性评估中的检测能力,优化病毒的感染率,以及确定中和模型中所需使用的病毒孵育量与孵育时间,确证荧光检测仪能够代替流式细胞仪进行中和活性的评价,且具有快速、高通量、操作简便等优势。　　 运用该系统进行小鼠单克隆抗体的筛选,获得20株具有中和活性的单抗,ELISA和Western Blotting结果显示所有20株单抗均为针对F蛋白的构象单抗,其中C-4G5的中和活性在7种不同来源的RSV敏感细胞株中均比Synagis高约10倍。　　 快速且高通量的荧光检测仪系统在中和模型中的成功运用,为中和单抗的制备和中和能力的评价提供了方法参考和研究思路,有助于对RSVF蛋白的表位进行全面深入的了解,为RSV疫苗的研制、诊断试剂开发和治疗药物的研发奠定了基础。