基于NF-κB信号通路探讨熊胆粉复方中药治疗非酒精性脂肪性肝炎的机制研究

来源 :福建中医药大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:xzh_endless
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目的:探讨熊胆粉复方中药治疗非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic steatohepatitis, NASH)的抗炎机制,观察其对NF-κB通路上NF-κB、TNF-αIL-6和COX-2等主要调控因子表达的影响,为熊胆粉复方中药的临床应用提供理论依据。方法:实验将成年雄性SD大鼠60只,随机分成正常组、模型组、复方蛋氨酸胆碱组、复方低剂量组、复方中剂量组、复方高剂量组。除正常组外,模型组和各治疗组采用高脂饲料喂养并且注射40%CCl4花生油溶液的方法复制大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型。在制备模型的同时,复方蛋氨酸胆碱组按0.24g/kg·d-1灌胃给药,复方各剂量组分别按0.462g/kg·d-1、0.924g/kg·d-1及1.848g/kg·d-1灌胃给药,正常组、模型组分别灌服生理盐水,连续给药30d后取材;称量各组大鼠体重、肝组织湿重,计算各组肝指数;检测血清ALT、AST、TG、 TC、HDL-C、LDL-C等生化指标;HE染色观察肝组织病理学改变,RT-PCR法检测大鼠肝组织中NF-κB、TNF-α、IL-6和COX-2mRNA的表达,免疫组化法观察NF-κB、TNF-α、IL-6和COX-2的蛋白表达情况。结果:(1)模型组大鼠体重和肝指数明显增加,和正常组比较有显著差异性(P<0.05),复方蛋氨酸胆碱组及熊胆粉复方中药各剂量组体重、肝指数明显降低,和模型组比较有显著差异性(P<0.05),熊胆粉复方中药组降低NASH大鼠体重及肝指数的作用呈现量效关系;(2)模型组大鼠血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C含量明显增加,而HDL-C含量较正常组明显降低,和正常组比较均有显著差异性(P<0.05);复方蛋氨酸胆碱组及熊胆粉复方中药各剂量组血清ALT、AST、TG、 TC、LDL-C含量明显降低,HDL-C含量明显增加,和模型组相比较均有显著差异性(P<0.05),熊胆粉复方中药组降低NASH大鼠的ALT、AST、TG、TC、LDL-C水平及升高NASH大鼠的HDL-C水平的作用呈现量效关系;(3)HE染色结果显示模型组大鼠肝组织有明显的脂肪性炎性改变(以肝细胞中大量脂肪空泡,伴有炎细胞浸润为主),而复方蛋氨酸胆碱组及熊胆粉复方中药各剂量组脂肪性炎性改变和模型组相比较明显减轻,熊胆粉复方中药组减轻NASH大鼠的脂肪性炎性改变的作用呈现量效关系;(4)模型组大鼠肝组织NF-κB、TNF-α、IL-6和COX-2的mRNA和蛋白表达明显升高,和正常组比较有显著差异性(P<0.05);复方蛋氨酸胆碱组及熊胆粉复方中药各剂量组中肝组织的NF-κB、TNF-α、IL-6和COX-2的mRNA和蛋白表达明显降低,和模型组相比较均有显著差异性(P<0.05),熊胆粉复方中药组降低NF-κB、TNF-α、IL-6和COX-2的mRNA和蛋白表达的作用呈现量效关系。结论:(1)熊胆粉复方中药具有肝脏保护作用,能降低非酒精性脂肪性肝炎引起的体重、肝指数、ALT、AST的升高,且呈现量效关系;(2)熊胆粉复方中药具有调节脂质代谢作用,能降低非酒精性脂肪性肝炎引起的TG、TC、LDL-C等浓度的升高,升高降低的HDL-C浓度,且呈现量效关系;(3)各组大鼠病理染色结果显示熊胆粉复方中药能明显改善NASH模型大鼠的脂肪性炎性病变情况,且呈现量效关系;(4)熊胆粉复方中药对肝组织细胞有明显的抗炎作用,能降低非酒精性脂肪性肝炎引起的NF-κB、TNF-α、IL-6和COX-2表达的升高,且呈现量效关系。因此调节NF-κB信号通路可能是其抗非酒精性脂肪性肝炎的作用机制之一。
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