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氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)是低密度脂蛋白(LDL)内大量多价不饱和脂肪酸在过量自由基及其它致氧因素作用下发生过氧化反应,最后产生丙二醛(MDA),MDA与LDL载脂蛋白B(APOB)中的赖氨酸残基结合发生化学修饰的产物。OX-LDL是动脉粥样硬化(AS)、心血管疾病发生发展的重要因素。OX-LDL检测在冠脉病变患者中是反映血脂异常的一个较敏感的指标。目前常用的OX-LDL检测方法很多,核磁共振、apoB荧光检测、酶联免疫吸附法(ELISA)检测等,其中最常用的是ELISA法检测血清OX-LDL。该法需要专门的仪器设备和专业操作人员,操作过程相对较复杂。胶体硒免疫层析技术作为一种新的快速临床诊断技术,其特点是省时省力,方便快捷,因此研制氧化低密度脂蛋白胶体硒快速检测试纸条具有重要的意义。本试验采用人源氧化低密度脂蛋白免疫过的BALB/c小鼠脾脏细胞与HGPRT缺乏的SP2/0骨髓瘤细胞融合,用HAT选择性培养后经间接ELISA检测挑选出阳性较高的能分泌抗氧化低密度脂蛋白抗体的融合细胞进行克隆化培养。最终制备出4株能稳定分泌抗人OX-LDL单克隆抗体的细胞株:B5、B6、D4、D9。这四株细胞经染色体分析,结果显示其染色体数目均高于骨髓瘤细胞,但是接近于两种亲本的总和。将上述四株细胞按10~6/ml的密度注射BALB/c小鼠腹腔,每只0.2ml,诱导腹水后,收集腹水,利用硫酸铵沉淀法提取和透析方法纯化抗人源OX-LDL单克隆抗体蛋白。并进一步对抗体蛋白的效价、相对亲和力、交叉性反应以及Ig类型等进行了测定。结果显示单克隆抗体均为IgM型,效价最高达1:12800,相对亲和力较好。将本试验制得的抗人OX-LDL单克隆抗体用胶体硒标记后包被于玻璃纤维载物垫上;羊抗鼠IgG包被于醋酸纤维膜的检测区上,作检测带;一定量的氧化低密度脂蛋白包被于醋酸纤维膜的半定量对比区上,作质控带。经试验可看到试纸条上有层析现象,且层析膜上出现色带,这些基础工作为后续该市纸条的优化提供了参考。