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斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)是工厂化栽培的主要食用菌之一。工厂化栽培的斑玉蕈在从营养生长阶段向生殖生长阶段转化需要经过45 d左右的后熟期,因此,较其他工厂化食用菌品种的生产效率低。研究表明添加外源皂苷后可以缩短菌丝后熟期,诱发原基的产生。本文拟进一步研究外源皂苷对斑玉蕈皂苷合成及抗氧化酶活性的影响,并从分子水平加以分析。本研究以斑玉蕈正常菌株SIEF3257和退化菌株SIEF3246为供试菌株,测定了不同培养时期菌丝体内源皂苷含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)酶活性及超氧阴离子和丙二醛(MDA)的含量,分析了内源皂苷含量与抗氧酶酶活性之间的关系;研究了外源皂苷对菌丝体皂苷合成及抗氧化酶活性的影响,并在转录水平加以分析;跟踪观测了不同培养时间栽培料菌丝体中皂苷含量,搔菌后至子实体形成初期菌丝体中内源皂苷含量、SOD和CAT酶活性、超氧阴离子和MDA的含量。主要得出如下结论:(1)正常菌株SIEF3257和退化菌株SIEF3246菌丝体中的皂苷含量均随着培养时间的延长而逐渐升高,但正常菌株的皂苷含量始终高于退化菌株;2个菌株SOD和CAT酶活性随着培养时间的延长呈下降趋势;丙二醛和超氧阴离子的含量逐渐升高,且正常菌株的含量要低于退化菌株;在菌丝快速生长的第7-11 d皂苷含量与抗氧化酶活性呈正相关。(2)添加0.01 g/L、0.05 g/L的外源皂苷可以提高内源皂苷的含量,其对正常菌株的作用优于对退化菌株的诱导的作用;可以明显提高正常菌株菌丝体内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性;当外源皂苷的浓度为0.05g/L时,在培养后期对退化菌株的超氧化物歧化酶活性反而有抑制作用;添加外源皂苷可以明显上调正常菌株SIEF3257鲨烯合酶基因(SQS)基因表达,但是对退化菌株SIEF3246SQS上调作用不显著;能够显著上调正常菌株SIEF3257的Mn-SOD和CAT基因表达量,其基因表达量的变化趋势与SOD酶活变化趋势相似,但CAT基因表达量变化趋势与酶活性的变化并不相同。(3)在栽培料中,自菌丝长满栽培瓶至搔菌前,随着培养时间的延长其菌丝体内的皂苷含量先升高后逐渐趋于平稳,其含量并不是随着菌丝体培养时间的延长而一直增多。在搔菌后至钉头期的培养过程中其皂苷含量整体上升,此过程中菌丝体内SOD和CAT酶活性都逐渐升高。综上所述,本研究证明了斑玉蕈菌丝体在快速生长期其机体内的内源皂苷含量与抗氧化酶活性呈正相关,添加适量外源皂苷能够提高斑玉蕈菌株内源皂苷含量及抗氧化酶活性,从而降低了菌丝体生长发育过程中活性氧及丙二醛的积累。这些结论为外源皂苷能够缩短斑玉蕈后熟期,诱发原基产生机理的揭示提供了一种思路。