发酵复方中草药添加剂防治奶牛隐性乳腺炎的初步研究

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在奶牛养殖业中,由于致病菌感染、管理不当、环境异常、遗传等因素引起的奶牛乳腺炎问题是奶牛养殖业最常见,也是造成经济损失最大的疾病。奶牛乳腺炎会导致奶牛产奶量降低、乳品质变差,严重的会导致乳房坏死甚至危及奶牛的生命。现临床上常应用抗生素来治疗奶牛乳腺炎,但会产生抗生素残留和微生物耐药性的增加的不良后果。为了探究一种新的治疗奶牛乳腺炎的方法以求在治疗乳腺炎的同时且没有副作用的出现。本研究结合奶牛乳腺炎的发病机制,设计复方中草药添加剂,饲喂给奶牛,观察中草药对奶牛乳腺炎的影响,期望能治疗奶牛乳腺炎。本实验分为体内试验和体外试验。体外试验:本研究以奶牛乳腺上皮细胞为体外模型,运用不同浓度的中草药有效成分处理奶牛乳腺上皮细胞,探讨中草药对细胞的影响。体内实验:本研究分别选取正常奶牛20头和隐性乳腺炎奶牛20头(乳汁中体细胞数大于5×105个/mL),并将正常奶牛随机分为两组,空白对照组和预防组,每小组10头,空白对照组饲喂基础日粮,预防组饲喂添加了复方添加剂的基础日粮;乳腺炎奶牛随机分为两组,治疗组和阴性对照组,每组10头,治疗组饲喂添加了复方添加剂的基础日粮,阴性对照组饲喂基础日粮。整个饲喂试验持续30天,每隔7天采集乳样,检测乳汁中体细胞数、乳脂率、乳蛋白率;每隔15天尾静脉采血,检测血清中SAA(Serum Amyloid A)、IL-1β(Interleukin-1β)、IL-2(Interleukin-2)、IL-8(Interleukin-8)的含量变化。结果:(1)试验一:不同浓度的中草药活性成分对奶牛乳腺上皮细胞的细胞活力无毒性作用,绿原酸(蒲公英抗炎活性物质)浓度为10μg/mL、鱼腥草素钠浓度为1μg/mL、王不留行黄酮苷浓度为20μg/mL可以显著提高奶牛乳腺上皮细胞的细胞活力。(2)试验二:空白对照组组与预防组间比较,发现体细胞数没有明显的变化。从饲喂第14天开始治疗组奶牛体细胞数逐渐缩小与空白对照组奶牛体细胞数的差距,在第21天治疗组体细胞数为42.1±10.55(104·mL-1)与正常奶牛体细胞数13.48±18.78(104·mL-1),差异不显著(P>0.05)。与此相反未饲喂中草药的阴性对照组奶牛体细胞数持续保持在较高的水平,且显著高于正常组奶牛体细胞数(P≤0.05)。(3)试验三:结果显示,在整个饲喂实验中,不同组别、不同处理奶牛乳汁的乳蛋白率和乳脂率均没有明显的变化(P>0.05)(4)试验四:治疗组奶牛在饲喂30天后血清中的SAA与第0天相比,具有显著性差异(P<0.05),并恢复至正常水平;空白对照组、预防组炎性标记物SAA无显著变化(P>0.05)。空白对照组和预防组奶牛血清中白介素因子1(IL-1β)炎症因子并没有显著的变化(P>0.05),在治疗组第30天IL-1β较治疗初期奶牛血清中的IL-1β极显著降低(P<0.01)。在第15天、第30天治疗组奶牛血清中IL-2较最初治疗组血清中IL-2极显著降低(P<0.01),同时发现在第15、30天预防组奶牛血清中的IL-2较同时期空白对照组血清中IL-2显著降低(P<0.05)。在试验30天后,治疗组奶牛血清中的IL-8含量与第0天相比显著降低(P<0.05),中草药对预防组奶牛血清中的IL-8没有显著影响(P>0.05)。结论:复方中草药添加剂对奶牛隐性乳腺炎有一定的预防和治疗效果。
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