三七总皂苷和灯盏花素抗皮肤光老化作用机制及比较研究

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目的:通过建立Balb/c小鼠皮肤光老化动物模型,通过研究三七总皂苷、灯盏花素局部外用对紫外线(UV)长期照射致Balb/c小鼠光老化皮肤中TEWL值变化的影响;研究三七总皂苷、灯盏花素局部外用对Balb/c小鼠光老化皮肤组织中MMP-1表达变化的影响;研究三七总皂苷、灯盏花素局部外用对Balb/c小鼠光老化皮肤组织中IL-1α和IL-6含量变化的影响,探讨三七总皂苷、灯盏花素抗皮肤光老化作用机制,比较两者作用孰强孰弱,为光老化的防治及护肤品的研制研发提供理论依据。方法:将50只健康雌性Balb/c小鼠随机分为10组:正常对照组(A组)、模型组(B组)、基质组(C组)、阳性对照组(模型+0.3%茶多酚D组)、实验组(模型+0.05%三七总皂苷E组、模型+0.1%三七总皂苷F组、模型+0.2%三七总皂苷G组、模型+0.05%灯盏花素H组、模型+0.1%灯盏花素Ⅰ组、模型+0.2%灯盏花素J组)。模拟日光中UV(UVA+UVB)照射,建立皮肤光老化动物模型,照射前将约0.1g基质凝胶;0.3%茶多酚凝胶;0.05%、0.1%及0.2%三七总皂苷凝胶;0.05%、0.1%及0.2%灯盏花素凝胶分别外搽于C组、D组、E组、F组、G组、H组、Ⅰ组及J组小鼠背部照光部位,经9周UV照射及外搽受试品后,通过无创性皮肤测试法检测经表皮水分丢失(TEWL)的变化;免疫组化实验法检测基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的表达水平,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测白细胞介素-1α (IL-1α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量变化。结果:经过9周UVA+UVB混合照射后,UVA及UVB辐射总剂量达到国内皮肤光老化动物模型建立的辐射总剂量,且B组Balb/c小鼠受试部位皮肤与出现红斑、脱屑、皱纹等光老化特征,提示Balb/c小鼠皮肤光老化动物模型建立成功。实验各组小鼠经过9周UVA+UVB混合照射及局部外用受试品后,检测相关指标结果示:1.B组经无创性皮肤测试法检测的TEWL值为5.95±0.37g/cm2·h,实验各组及D组检测的TEWL值均低于B组,其中E组、G组、H组、Ⅰ组及D组分别与B组比较差异具有统计学意义(P<0.05),具有修复皮肤屏障功能的作用,实验各组中G组TEWL值最低;2.根据Shimizu法对免疫组化检测的MMP-1表达结果进行判定,B组表达为强阳性,E组表达为阳性,F组表达为阳性,G组表达为弱阳性,H组表达为阳性;Ⅰ组表达为弱阳性,J组表达为阳性,D组表达为弱阳性;实验各组及D组MMP-1的表达均低于B组,对着色程度积分进行秩和检验结果示,E组、F组、G组、H组、Ⅰ组及D组分别与B组比较,差异具有统计学意义(P<0.05),具有抑制MMP-1表达的作用,实验各组中G组MMP-1表达最弱;3.B组经ELISA法检测的IL-1α含量为164.1±3.8ng/L,IL-6含量为210.6±1.2ng/L,实验各组及D组检测的IL-la和IL-6含量均低于B组,其中F组、G组、H组、I组、J组及D组分别与B组比较差异具有统计学意义(P<0.05),具有下调炎症细胞因子IL-1α和IL-6含量的作用,实验各组中G组IL-1a和IL-6含量最低。结论:外用三七总皂苷、灯盏花素凝胶可以修复UV照射诱导Balb/c小鼠皮肤光老化模型的皮肤屏障功能,下调炎症细胞因子的含量,抑制MMP-1的表达,从而起到抗皮肤光老化作用,其中浓度为0.2%的三七总皂苷组抗皮肤光老化作用效果最佳,为开发抗皮肤光老化的医学护肤品提供试验基础。
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