淫羊藿苷调控VEGF相关信号通路干预血管新生的作用及临床研究

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目的:从祖国医学理论角度分析并联系临床实际情况来看,在肺纤维化的病机演变过程中肾阳虚具有重要意义,治疗上在益气、祛痰、活血、通络的基础上兼顾补肾温阳可获良效。现代医学在肺纤维化的病理及发病机制的研究中发现,血管新生异常可能诱发或加速肺纤维化进展,血管内皮生长因子(VEGF)作为一种促血管新生因子,对肺纤维化的形成与进展有干预作用。本研究通过体外细胞实验观察淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞的影响,探究淫羊藿苷抑制血管新生作用及机制,观察VEGF相关通路关键因子的基因及蛋白表达,从而推测温肾阳中药淫羊藿是否通过干预血管新生起抗肺纤维化的作用,并寻找作用靶点,为临床用药提供实验依据。通过典型案例分析,探讨临床治疗有肾阳虚表现的肺纤维化患者的证治方药及作用机理,并总结了导师临床经验。理论探讨、临床分析与实验研究相结合以期为治疗肺纤维化提供新思路。
  方法:实验研究:CCK-8法检测淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞增殖的作用及其最大无毒浓度,通过Transwell小室趋化实验、划痕愈合实验检测淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞迁移的影响,采用ELISA法测细胞上清液中VEGF的浓度检测淫羊藿苷对细胞VEGF分泌的干预作用,Real time-PCR检测VEGF基因表达,Western blot检测血管新生相关因子VEGF、PLCγ1、PI3K、Akt的蛋白表达。
  结果及结论:淫羊藿苷能抑制肺微血管内皮细胞的增值、迁移,降低血管新生相关因子VEGF、PLCγ1、PI3K、Akt的表达水平,故推测淫羊藿苷可能通过干预VEGF等相关信号通路抑制血管新生,从而减缓肺纤维化的进展,为临床淫羊藿预防和治疗肺纤维提供实验理论依据。
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