龙胆泻肝汤护肝保肝抗炎作用及其机理研究

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龙胆泻肝汤来源于?医方集解?,该方为泻肝胆实火,清三焦湿热之代表方剂。它由龙胆草、栀子、黄芩、柴胡、生地、木通、车前子、泽泻、当归、甘草组成。单味中药的现代研究结果表明该方诸药分别具有抗菌、消炎、解热、利胆、保肝、降压、祛血脂、利尿等作用,成方研究结果表明龙胆泻肝汤具有增加幼鼠胸腺重量,提高巨噬细胞吞噬功能,促进淋巴细胞转化等免疫增强作用。我们通过大量的文献调查,结合现代免疫学研究成果,认为“泻肝胆实火,清三焦湿热”的作用机理可能与干预免疫系统和肠道黏膜免疫系统等作用机理有关,但迄今为止,国内外未见这方面的研究报道。本实验目的是研究龙胆泻肝汤对肝胆系统功能活动及免疫系统和肠道黏膜免疫的影响,探讨其护肝、保肝、抗炎的作用机理。主要完成了龙胆泻肝汤对肝胆功能相关生理生化参数的影响、对肝损伤的保护作用和对免疫系统及肠道黏膜免疫系统的影响等三方面的研究。为了观察本方在实验条件下对肝胆功能的影响及是否有毒性副作用,我们使用生物化学方法检测反映肌肉组织、肝脏、肾脏等器官功能的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿酸(UA)、肌酐(CRE)、肌酸激酶(CK)等指标。结果表明连续4周按小鼠体重0.5~2 g/Kg/日剂量古典配伍的龙胆泻肝汤,对小鼠的主要生物化学参数没有显著影响,说明古典配伍的龙胆泻肝汤在本实验条件下对小鼠肝功能、肾脏功能、肌肉组织等没有毒性副作用。为了研究龙胆泻肝汤的保肝作用,我们观察龙胆泻肝汤对四氯化碳(CCl4)引起的小鼠实验性肝损伤的预防作用。结果表明龙胆泻肝汤可使实验性肝损伤小鼠血清中升高的乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)值降低,且对前者有显著影响;龙胆泻肝汤显著改善或减少了CCl4引起的动物肝细胞浆疏松化、肝细胞的空泡变性、脂肪变性和坏死,说明龙胆泻肝汤对小鼠实验性肝损伤有一定保护作用。其保肝作用的机理可能与消除四氯化碳进入体内生成的自由基对细胞膜脂质过氧化作用有关。为了探讨龙胆泻肝汤在临床广泛用于抗炎及治疗感染性病证的机理,我们研究了龙胆泻肝汤对小鼠脾脏T细胞亚群动态变化、免疫器官指数以及肠道黏液所含的分泌型IgA(S IgA)水平的变化等免疫系统的影响。为此,选用120只健康的ICR小鼠,随机分成5组,除空白组外所有小鼠腹腔注射0.025 mg/ mL脂多糖,0.2 mL/只;然后灌胃给与相应的药物,0.2 mL/d/只,连续用药20 d。于第15 d、20 d灌胃30 min后,从各组中随机抽出8只,雄雌各半,称量体重,断髓致死,采集样品观察。结果表明:龙胆泻肝汤按小鼠体重0.5 g/Kg/日的剂量给药,既能提高CD4+ T淋巴细胞百分率,又能抑制CD8+ T淋巴细胞百分率,从而使CD4+/ CD8+作用的比值显著上升;按小鼠体重0.5 g/Kg/日和2 g/Kg/日的剂量给药,3周后可显著提高小鼠脾指数;按体重0.52 g/Kg/日的3个剂量给药组,对小鼠肠道黏液中的分泌性SIgA均无显著作用,但随服药时间的延长有下降趋势。表明适当剂量的龙胆泻肝汤具有增强系统免疫的功能,其作用机理与促进脾脏内淋巴细胞增殖、分化有关。因龙胆泻肝汤属大寒沉降类中药,对肠道蠕动、黏液分泌有明显的抑制,因此,可能亦有轻度抑制肠道黏膜免疫的作用,但本方对黏膜淋巴细胞组织、黏膜下淋巴组织、肠固有膜淋巴细胞以及相关淋巴因子IFN-γ、IL-5、IFN-α和IL-2等的酶联免疫组织化学的实验研究,目前我们尚未完成。因此,要阐明本方对肠道黏膜免疫系统确切的影响,还有待进一步的研究探讨。
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