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本论文研究了柴胡提取物(BE)对热应激奶牛生产性能、血液激素、物质代谢、血常规、抗氧化能力以及免疫能力的影响,并研究了柴胡皂苷a(SSa)和d(SSd)对热诱导奶牛乳腺上皮细胞抗氧化酶活和热休克蛋白基因表达丰度的影响,初步探明了BE缓解奶牛热应激的机理。为BE在热应激奶牛生产中的应用提供了理论依据和参考。该研究主要从以下方面进行:1.不同剂量BE对热应激奶牛生产性能和血液基础代谢的影响:试验根据产奶量(37.5±1.8kg/d)、泌乳天数(75+15 d)以及胎次(1.7±0.4)等相近的原则将40头荷斯坦奶牛随机分为4个处理组,每组10头,分别饲喂4种不同的处理日粮,即在基础日粮中分别添加0、0.25、0.5和1.0 g/kg的柴胡提取物(DM基础),试验期10周。试验牛只采用栓系式饲养模式,单独饲喂。试验期间牛舍每天平均THI均大于72,因此,该试验是在热应激条件下完成的。结果表明,0.5g/kgBE显著降低了奶牛的RR(P<0.05);不同剂量的BE均降低了奶牛的RT,其中以中午时刻效果最显著(P<0.01);BE提高了热应激奶牛的DMI(P<0.05),0.25和0.5 g/kg的BE剂量提高奶牛的产奶量(P<0.05)。BE降低了热应激奶牛血液中COR浓度(P<0.05),提高了T3、PRL、GH和LEP浓度(P<0.05),有降低GLU浓度的趋势(P<0.1),但是对血清中T4、INS、NPY、 IGF-I和HSP70含量没有显著影响。BE添加组显著提高了奶牛血液中11P含量(P<0.05),但是对Glu、NEFA、TG、TC、LDL-C和HDL-C没有显著影响(P>0.05).0.25 g/kg的BE显著增加了热应激奶牛血液中ALB的含量(P<0.05),0.25和0.5 g/kg的BE显著降低了热应激奶牛血液中BUN的含量(P<0.05)。BE添加组显著提高了热应激奶牛血液中K+(P<0.05),但不影响Mg2+的浓度(P>0.05)。0.5和1.0 g/kgBE提高了热应激奶牛血液中Na+和Ca2+的浓度(P<0.05),1.0 g/kg BE降低了血液中P的浓度(P<0.05)。饲喂0.5 g/kgBE提高了血液中C1含量(P<0.05)。BE对WBC.MCV.MCHC.PLT和MPV的含量无显著影响。0.5 g/kgBE提高了RBC、HGB、HCT和RDW的含量(P<0.05)。1.0g/kg BE提高了MCH含量(P< 0.05)。0.25 g/kg BE提高了热应激奶牛的SOD和GSH-Px活性(P<0.05)。添加BE有提高奶牛血液中T-AOC浓度和降低MDA含量的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。0.25和0.5g/kg BE提高了热应激奶牛血液中IgA.IgG、IL-2、IL-4和IL-6的含量(P<0.05);但是,BE对IgM和TNF-α的含量以及T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+百分含量和CD4+/CD8+的比值无显著影响(P>0.05)。2.研究柴胡皂苷a(SSa)和d(SSd)对热诱导奶牛乳腺上皮细胞抗氧化酶活和热休克蛋白家族基因表达的影响:以38℃作为对照组,以培养基中添加0.0.1、1.0μmol/L的SSa和0,0.01、0.1 μmol/LSSd作为处理组,42℃处理1、4、8、12和24h,检测奶牛乳腺上皮细胞中SOD、GSH-Px和CAT活性,热休克蛋白家族基因表达及细胞培养基中MDA的含量。结果表明:42℃不同处理时间细胞的SOD、GSH-Px和CAT活性下降(P<0.05), MDA含量升高(P<0.05)。与42℃对照组相比,不同皂苷添加组能提高细胞中SOD、GSH-Px和CAT活性,降低细胞培养基中MDA含量,在热处理前4h,细胞中酶活活性提高(P<0.05),12h后,0.01和0.1 μmol/LSSd剂量组MDA含量下降(P<0.05)。热休克转录因子HSF-1和热休克蛋白基因HSP27和HSP70在高温处理前4h表达上调(P<0.05), HSP90的mRNA表达在热处理8h后上调(P<0.05)。热处理前4h时,SSa和SSd组HSP70和HSP90基因的]mRNA转录水平上调(P<0.05),热处理1h时,SSa和SSd组HSP27基因的mRNA转录水平上调(P<0.05),SSa和SSd组的HSF-1基因的mRNA转录水平在热处理8h时较38℃和42℃组细胞的HSF-1基因表达丰度上调(P<0.05)。因此,SSa和SSd提高了热应激奶牛乳腺上皮细胞SOD、GSH-Px和CAT含量,显著降低了MDA含量,并且提高了热休克蛋白家族基因的表达丰度,这表明SSa和SSd对热应激造成的氧化应激以及细胞损伤起了很好的保护作用:综述所述,BE提高了热应激奶牛的采食量和产奶量,改善了奶牛的物质代谢,提高热应激奶牛的抗氧化能力和免疫能力。因此,BE可以缓解奶牛热应激,适宜剂量为0.25~0.5 g/kg。SSa和SSd显著提高了奶牛乳腺上皮细胞的抗氧化酶活含量,上调了热休克蛋白家族基因的表达,其可能是BE起解热作用的活性成分,并还存在其它活性成分,有待进一步研究。