女性癌症患者中,因化疗损伤卵巢而导致的过早闭经以及不孕是很常见的现象。对于这些病人来说,化疗前成熟卵子/胚胎或者卵巢组织冰冻保存是她们保存生育能力的主要选择。但是,对于她们卵巢功能的长期保护,尤其是生育能力的保存,以上方法是有局限性的。青春前期的女性由于卵巢功能尚未成熟,所以无法进行成熟卵子或胚胎冻存;对于未婚的成年女性,胚胎冻存则需要捐献者的精子,且卵子或胚胎冻存,都需要药物促排卵操作,这个操作过程不仅耽误癌症的治疗时间,同时也可能使雌激素敏感性癌进一步发展。目前卵巢组织冰冻保存还处于实验阶段,且化疗后再移植还存在引起癌症复发的可能。因此,对于很多化疗后获得长期生存的不孕女性来说,寻找一种经济、持久、安全及可靠的方法来挽救他们的卵巢功能及生育能力是社会急需解决的一项大事。2009年Zou等首次从小鼠卵巢中分离得到雌性生殖干细胞,并证实了该干细胞在体内可以形成卵子并产生后代,从而首次真正意义上的证实了哺乳动物卵巢中存在生殖干细胞。2012年White等在验证了Zou等实验基础上同时首次从育龄期妇女卵巢中分离得到女性生殖干细胞。以上实验结果将为运用雌性生殖干细胞治疗女性不孕甚至延缓卵巢衰老提供理论基础。考虑到现实中已经有成千上万的年轻女性患者因化疗而导致卵巢功能受损甚至不孕,本研究通过化疗诱导雌性小鼠卵巢性不孕来模拟女性患者化疗后卵巢性不孕,探讨雌性不孕小鼠卵巢内是否存在生殖干细胞以及用此干细胞移植能否挽救因化疗导致的卵巢功能受损及不孕。我们成功的从化疗后不孕小鼠卵巢内分离得到了生殖干细胞,并通过RT-PCR,免疫荧光,碱性磷酸酶染色以及核型分析等多方面鉴定该细胞的特性;功能方面,利用GFP慢病毒转染干细胞并移植到化疗不孕小鼠卵巢内,小鼠生育能力得到恢复并产生后代;通过PCR和Southern blot鉴定鼠尾基因组DNA中的GFP基因,证实了GFP转基因鼠是来源于生殖干细胞分化后受精而产生的。本实验首次证实了化疗后不孕小鼠卵巢内存在雌性生殖干细胞,且该干细胞卵巢移植后可以修复卵巢功能以及生育能力,这为临床上化疗后卵巢功能受损以及不孕病人利用自身生殖干细胞进行自体移植治疗提供了一定的理论基础及参考价值,为新的治疗方案带来希望。