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目的：观察丹参注射液对宫内感染/炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化症突触素(SYP)和神经生长相关蛋白(GAP-43)表达的影响,探讨活血化瘀药物改善宫内感染/炎症致早产脑损伤的机制,提出宫内感染/炎症致脑白质软化症的中医药治疗可以从瘀论治的新理论。
方法：( 1 )动物模型制备：24 只孕第 16 天的脂多糖(LPS)组大鼠予LPS350μg/kg·d,连续两天腹腔注射,6 只孕鼠于孕第 16 天予等剂量生理盐水腹腔注射,连续两天作为对照组。孕21天前分娩的仔鼠为早产仔鼠。记录两组孕鼠的分娩时间及出生体重,观察新生仔鼠的行为活动。仔鼠出生后即刻随机选 LPS组和对照组孕鼠各 4 只取子宫和胎盘 HE 染色观察宫内感染情况,判断标准为大量中性粒细胞浸润。随机选 LPS 组和对照组仔鼠各 10 只断头取脑 HE 染色,观察脑室周围白质损伤情况。(2)随机选 LPS 组孕鼠早产仔鼠 40 只,随机分为 4组,每组10只。分别为：丹参注射液高剂量组( A),丹参注射液低剂量组( B),神经节苷脂组(C),模型组(D)。随机选对照组孕鼠足月仔鼠 10只,为正常对照组(E)。5组大鼠同等条件下喂养。干预方法：LPS组孕鼠仔鼠每组随机选取 10只,于生后第 8天给予干预。A组予丹参注射液高剂量 9ml/㎏·d,B组予丹参注射液低剂量4.5ml/㎏·d,C组予单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液6mg/㎏·d,D组予生理盐水 9ml/㎏·d,E 组予生理盐水 9ml/㎏·d,均腹腔注射,连续 7 天。随后同条件继续喂养至 21日龄。(3)21日龄时对5组大鼠进行神经行为学测试(采用悬吊试验、斜坡试验、Cylinder试验),并取脑组织采用免疫组化方法对 SYP、GAP-43进行测定。
结果：(1) LPS组24只孕鼠中6只孕鼠分娩前死亡,13只孕鼠娩出早产仔鼠79只,死产仔鼠41只,余5只足月顺利生产,娩出足月仔鼠 49只,死产仔鼠5只,剔除足月鼠；对照组6只孕鼠均足月顺利生产,孕鼠无提前分娩及死亡,共娩出活产足月仔鼠57只,无死产仔鼠；与正常对照组仔鼠相比,LPS组仔鼠出生时皮肤颜色紫绀、体重低、活动少；LPS 组子宫及胎盘病理 HE 染色见大量中性粒细胞浸润,说明模型组孕鼠存在宫内感染；LPS组仔鼠脑组织白质结构稀疏,胶质细胞聚集,可见出血改变。(2) 于21日龄行为学测试,3种方法行为学测试,结果：药物干预组与模型组相比,药物干预组仔鼠反应快,四肢活动灵活,悬吊时上肢抓握时间较长,在斜坡停留时间短,后足站立时前足触壁次数百分比值较高,而模型组仔鼠反应迟钝,四肢活动不如干预组,悬吊时上肢抓握时间短,在斜坡上停留时间长,后足站立时前足触壁次数百分比值较低,两组之间差异有极显著意义(P<0.01)；药物干预组与正常对照组相比,正常对照组反应较快,两组之间差异有极显著统计学意义(P<0.01)；药物干预组中丹参高剂量组与神经节苷脂组相比,两组仔鼠反应均快,四肢活动灵活,两组之间差异无显著统计学意义(P>0.05)；药物干预组中丹参高剂量组与丹参低剂量组相比,两组仔鼠均反应快,活动灵活,两组之间差异无显著统计学意义(P>0.05)；药物干预组中神经节苷脂组与丹参低剂量组相比,两组仔鼠四肢活动均灵活,两组之间差异无显著统计学意义(P>0.05)。(3)丹参注射液干预治疗后使宫内感染/炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化症中SYP、GAP-43阳性表达均增加。SYP、GAP-43结果：药物干预组与模型组相比,药物干预组对宫内感染/炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化中SYP、GAP-43阳性表达较模型组增多,两组之间差异有极显著意义(P<0.01)；药物干预组与正常对照组相比,正常对照组中 SYP、GAP-43 阳性表达较药物干预组增多,两组之间差异有极显著统计学意义(P<0.01)；药物干预组中丹参高剂量组与神经节苷脂组相比,两组仔鼠经药物干预后脑组织 SYP、GAP-43 均增多,两组之间差异无显著统计学意义(P>0.05)；药物干预组中丹参高剂量组与低剂量组相比,两组仔鼠 SYP、GAP-43 阳性表达均增多,两组之间差异无显著统计学意义(P>0.05)；药物干预组中神经节苷脂组与丹参低剂量组相比,两组仔鼠 SYP、GAP-43阳性表达均增多,两组之间差异无显著统计学意义(P>0.05)。
结论：(1)丹参注射液对宫内感染/炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化症仔鼠行为学方面具有明显的改善作用。(2)丹参注射液对宫内感染/炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化症的作用机制,可能与上调SYP、GAP-43的表达有关。(3)宫内感染/炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化症的中医病理机制主要是―血瘀‖的理论,活血化瘀药物治疗有效。