拔牙创愈合过程中SDF-1表达与分布的实验研究

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临床拔牙创伤是导致口腔组织缺损的最常见原因之一。组织缺损的修复重建是一个非常复杂的生物学过程,在此过程中各种细胞及活性因子参与其中并发挥重要作用。研究证明,基质细胞衍生因子1(stromal-derived factor-1 SDF-1)在创伤愈合过程中发挥重要作用,通过SDF-1/CXCR4信号通路介导自体干细胞趋化,在组织或器官受到损伤后,骨髓基质干细胞可在其趋化下向这些部位靶向分布以促进新血管形成和损伤组织的修复。然而,SDF-1在拔牙创愈合过程中的表达和作用尚未见研究报道。研究目的:观察具有自体干细胞趋化作用的生物活性因子SDF-1在拔牙创软硬组织愈合过程中的表达、分布特点。研究方法:6-8周龄SPF级Wistar雄性大鼠42只,体重180-220g。随机分为A、B两组,各21只。每组按照拔牙后不同的时间点随机分为拔牙0、1、2、4、7、10、14天共七组,麻醉后拔除大鼠左侧下颌第一磨牙。A组通过H-E染色、免疫组织化学染色法观察SDF-1在拔牙后拔牙创愈合不同阶段软硬组织中的的表达和分布特点;B组利用实时荧光定量PCR技术对SDF-1mRNA在拔牙后各阶段拔牙创组织中的表达变化情况进行定量研究。研究结果:免疫组织化学染色显示,拔牙后1、2天创口周围牙龈组织内SDF-1表达增强,染色部位主要分布于牙龈上皮的棘层及基底层细胞胞浆与细胞间,且越靠近基底层细胞染色越明显;拔牙窝内残存的牙周膜、血凝块中白细胞及纤维蛋白呈SDF-1阳性表达。拔牙后4天,牙龈组织的阳性染色部位主要位于基底细胞层;拔牙窝创缘及新生肉芽组织内可见新生血管内皮细胞和增殖活跃的成纤维细胞阳性表达。拔牙后7天,牙龈上皮细胞层染色变得均匀,固有层仍可见阳性染色的新生血管内皮细胞及成纤维细胞;拔牙窝内新生类骨质中的成骨细胞及新生血管的内皮细胞染色相对明显。拔牙后10天,牙龈上皮染色特点基本与正常牙龈相似,上皮层细胞染色均匀,固有层可见少量细胞着色;拔牙窝疏松的类骨质内成骨细胞阳性染色。拔牙后14天,软组织染色接近正常牙龈组织水平;拔牙窝内新生骨小梁的成骨细胞及血管内皮细胞可见SDF-1阳性表达。RT-PCR检测,拔牙创愈合过程中软组织内SDF-1mRNA的表达水平呈双峰变化的特点,在拔牙后1天达到最高(p<0.01),第2天开始下降p<0.05),拔牙后4天出现二次峰值(p<0.01),7天后其表达水平仍高于对照组((p<0.05))10天时恢复正常水平p>0.05);拔牙创骨组织愈合过程中SDF-1mRNA的表达呈现单峰变化的趋势,拔牙后1、2天逐渐升高(p<0.01),至第4天达到峰值(p<0.01),然后逐步下降,至拔牙后14天,SDF-1mRNA的表达水平相对降低但仍高于正常水平(p<0.05),。研究结论:SDF-1在拔牙创软硬组织愈合过程中持续表达,可能参与了拔牙创的愈合过程。通过SDF-1募集干细胞的作用特性,有望为临床促进拔牙创愈合与口腔种植体的愈合提供新思路。
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