恶性肿瘤是当前威胁人类健康的主要疾病之一,根据世界卫生组织公布的资料表明,全球每10个死亡者,其中就有1人死于癌症。目前,治疗肿瘤的方法有很多种,包括放疗、化疗以及外科手术疗法等。而关于超声在肿瘤治疗中的应用就涉及到高强度聚焦超声疗法、超声热疗法和超声声动力学疗法。 声动力学疗法是由日本学者Umemura S.于上世纪80年代末提出的一种以超声结合血卟啉的联合作用杀伤肿瘤细胞的新方法,该疗法是利用超声具有穿透深部组织并能聚焦于肿瘤部位,激活相对无毒性且能长时间富集在肿瘤组织的血卟啉,从而对肿瘤产生杀伤作用的。由于该方法对于治疗肿瘤细胞有较强的针对性以及对正常组织的无创伤性,所以对于治疗肿瘤,特别是组织深层肿瘤有着较好的应用前景。近些年来,国内外学者对声动力疗法杀伤肿瘤的作用机理开展了多学科的研究工作,并取得了一定的成果,但对于其确切作用机制尚不能定论。 本论文在前人研究结果之上,以国家自然科学基金项目“超声激活血卟啉抗肿瘤的细胞分子生物学机制”和“超声激活血卟啉诱导肿瘤细胞凋亡的分子生物学机制”为依托,完成了其中的一部分工作,目前取得的实验结果如下: 1.测得实验所用血卟啉的最大荧光激发波长为402nm,最大荧光发射波长为596nm,在此基础之上,通过荧光分光光度法测得加入血卟啉后45min时S180肿瘤细胞内HpD含量最高,此为最佳的超声处理时间;而对于肿瘤组织而言,杀伤肿瘤的最佳处理时间点应选择在24h—72h之间。 2.通过不同强度超声对S180肿瘤细胞的杀伤作用研究得出:不同超声强度下,细胞的存活率有所不同;不论是单纯超声组还是超声结合血卟啉组,细胞存活率都随超声强度的增加而下降。通过不同超声处理时间对S180肿瘤细胞的杀伤作用研究得出:不同超声处理时间下,细胞的存活率有所不同;不论是单纯超声组还是超声结合血卟啉组,细胞存活率都随超声处理时间的增加而下降。 3.通过光镜、扫描电镜和透射电镜技术观察了频率为2.2MHz、强度为4W/cm~2的聚焦超声结合血卟啉处理后S180肿瘤细胞显微以及超微结构变化,结果表明:单纯超声对S180肿瘤细胞有一定的杀伤效应,而超声结合血卟啉所产生的协同效应对S180肿瘤细胞的杀伤作用明显高于单纯超声组;超声结合血卟啉可以破坏肿瘤细胞的显微以及超微结构,尤其是对肿瘤细胞膜和膜性细胞器的通透性和结构的损伤,且在杀伤肿瘤细胞的同时存在诱导肿瘤细胞凋亡的现象。细胞显微、超微结构以及Annexin V-PI研究的结果表明:在超声结合血卟啉杀伤S180肿瘤细胞