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海地瓜是我国大宗低值海参,多糖和蛋白质是其体壁主要组成成分。本课题以海地瓜干品为原料,优化酶解及超滤工艺,联合制备出不同分子量段海地瓜多糖和多肽。确定柱层析法分离纯化海地瓜多糖的制备工艺,初步研究海地瓜多糖的化学组成及结构特点。此外对比探究了不同分子量段海地瓜多糖和多肽的体外抗氧化活性。主要研究结果如下:确定海地瓜多糖和多肽联合制备的最佳工艺。先用胰蛋白酶在料液比1:40,加酶量2.4%、pH值7.5、45℃下酶解8 h,然后超滤分离得到分子量小于10 KDa的海地瓜多肽,提取率达到(29.602±1.012)%。先后使用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶对超滤截留液及一次酶解沉淀进行二次酶解:加入7%中性蛋白酶,45℃下酶解4 h;再加入8%木瓜蛋白酶,60℃下酶解4h,pH值为7.0。粗多糖提取率达到(14.511±0.162)%。最佳超滤条件:操作压力0.20 MPa,料液浓度6%,操作温度35℃。对海地瓜多肽混合液进行超滤分级,依次得到3个不同分子量段的海地瓜多肽:P1(5～10KDa,48.47%)、P2(1～5 KDa,18.46%)和P3(<1 KDa,33.07%)。对海地瓜粗多糖提取液进行超滤分级,依次得到4个不同分子量段的海地瓜粗多糖:G1(<10KDa,63.09%)、G2(10～100 KDa,7.24%)、G3(100～200 KDa,4.67%)和 G4(>200 KDa,25.00%)。采用Q-Sepharose-Fast-Flow阴离子交换柱层析法对G4进行纯化,在0 mol/L、0.5 mol/L和1.5 mol/L洗脱浓度下,得到3个纯化多糖组分G4-1、G4-2和G4-3。化学组成测定结果表明,随着分子质量的增大,海地瓜粗多糖中总糖和硫酸根含量逐渐增加,蛋白含量逐渐减少。纯化多糖G4-1总糖、蛋白质、氨基己糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖和硫酸根含量分别为67.35%、4.98%、3.21%、7.99%、43.98%、1.29%,推测是硫酸酯化程度很低的岩藻聚糖;G4-2各组分含量分别为34.45%、21.98%、11.17%、9.88%、10.18%、16.16%,推测是海地瓜糖胺聚糖;G4-3各组分含量分别为54.81%、1.08%、9.30%、9.58%、23.48%、25.59%,推测是高度硫酸酯化的岩藻聚糖。通过红外光谱分析进一步确认,G4-2为多糖-蛋白质复合物,G4-3中硫酸根含量最高,G4-1和G4-3的糖苷键的构型为α-吡喃糖构型,G4-2的糖苷键的构型为α-呋喃糖构型。体外抗氧化活性检测结果显示,不同分子量段海地瓜多肽的·OH清除能力为:P3>P2>P1,对DPPH·和O-2·的清除能力为:P2>P3>P1。海地瓜粗多糖的·OH、DPPH·和O-2·清除能力依次为:G4>G1>G3>G2,G4>G3>G1>G2,G1>G4>G2>G3。纯化多糖的·OH清除能力为:G4-1>G4-2>G4-3,对DPPH·和O-2·的清除能力为:G4-2>G4-1>G4-3。