东海厚壳贻贝多糖的分离提纯和免疫学活性研究

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目的:为深入研究海洋生物多糖的药用价值,对厚壳贻贝多糖进行分离提纯和生物学活性的研究。 方法: 1.厚壳贻贝多糖的分离纯化 通过热碱法提取厚壳贻贝多糖粗品。多糖粗品经过DEAE-52柱、Sephacryl S-200柱,并通过高效液相色谱(HPLC)制备厚壳贻贝多糖纯品。 2.厚壳贻贝多糖的生物学活性研究 配制三种浓度(2mg/ml、4mg/ml、7.5mg/ml)的厚壳贻贝多糖粗品溶液,分别进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、NK细胞活性测定,抗体生成细胞的检测、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞等实验,并用MTT法对荷瘤小鼠进行了脾淋巴细胞增殖活力测定。经HPLC纯化的厚壳贻贝多糖纯品配制三种浓度(1.4mg/ml、0.7mg/ml、0.35mg/ml)进行了脾淋巴细胞增殖活力测定以及对抗H2O2的细胞损伤作用进行的研究。 结果:制得厚壳贻贝多糖粗品,呈白色粉末状,水溶性好。各项生物学活性结果表明厚壳贻贝多糖粗品能有效的增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率(P<0.01);增强小鼠迟发型变态反应(P<0.01)、NK细胞活性(P<0.01)、抗体形成细胞活性(P<0.01)及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性(P<0.01),且随多糖溶液浓度增高而增强(各浓度组间相比P<0.01);并非常显著的增加荷瘤小鼠的脾脏细胞的活力(P<0.01)。厚壳贻贝多糖粗品经过DEAE-52柱,Sephacryl S-200柱,以及高效液相色谱,通过视差显示器,可见单一对称峰,纯度较高。收集洗脱峰作生物学活性检测。小鼠脾淋巴细胞活力测定结果显示,多糖纯化样品能显
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