泽漆乙酸乙酯提取物对SGC7901/DDP多药耐药性的逆转作用

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luocai1982
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研究目的:探索EAE对胃癌耐药细胞SGC7901/DDP是否具有逆转作用,并探索其可能的机制,为EAE逆转胃癌多药耐药性的临床试验提供理论依据。研究方法:通过系统溶剂法将泽漆化学组分分离,并萃取提纯泽漆的化学组分。本研究所用的试剂是泽漆乙酸乙酯提取物。本研究所用的细胞有SGC7901、SGC7901/DDP、SGC7901/DDP+EAE(终浓度lOug/mL)、 SGC7901/DDP+EAE(终浓度20ug/mL)。第一部分:主要是观察SGC7901细胞和SGC7901/DDP细胞的形态及生长状况,并绘制其生长曲线;观察两种细胞的侵袭迁移能力;MTT法检测细胞的耐药状况以及RT-PCR检测耐药基因MDR1和LRP mRNA的表达情况;第二部分:主要是MTT法检测EAE对耐药细胞SGC7901/DDP的逆转作用,并通过RT-PCR检测耐药基因MDR1和LRPmRNA的表达情况和Western blot检测对应的耐药蛋白P-gp和LRP的表达情况。研究结果;与SGC7901细胞相比,SGC79041/DDP细胞形态发生变化,不规则,边界模糊,细胞的群体倍增延长约6.5 h分别为32±0.82 h、25±0.76h,细胞的侵袭和迁移能力增加,SGC-7901/DDP对5-FU和顺铂表现出耐药性,且对顺铂耐药更为明显;SGC7901/DDP细胞比SGC7901细胞的MDR1和LRP mRNA的表达明显升高,且具有统计学意义。MTT法检测EAE的逆转作用时发现,在EAE终浓度为lOug/mL和20ug/mL时5-FU的耐药倍数为3.80、2.68,逆转指数为:2.28、2.93;DDP的耐药倍数为4.40、4.58,逆转指数:3.24、4.58。RT-PCR法检测组耐药基因MDR1和LRP的表达发现在SGC7901/DDP细胞中MDR1和LRP mRNA表达最高,在SGC7901/DDP+EAE(终浓度10ug/mL)的MDR1和LRP mRNA表达下降,在SGC7901/DDP+EAE(终浓度20ug/mL)的MDR1和LRP mRNA表达下降更为明显。Western blot检测P-gP和LRP,发现SGC7901细胞只检测到P-gP蛋白的低量的表达,检测到LRP蛋白的极低量表达,然而在SGC7901/DDP细胞中P-gP和LRP表达最高,在SGC7901/DDP+EAE(终浓度lOug/mL)的P-gP和LRP表达下降,在SGC7901/DDP+EAE(终浓度20ug/mL)的P-gP和LRP表达下降更为明显。结论:1.EAE可以逆转胃癌耐药细胞SGC7901/DDP多药耐药;2.MDR1和LRP基因的下调及其对应的P-gP和LRP的表达降低可能是EAE逆转胃癌耐药细胞SGC7901/DDP的机制。
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