绒山羊骨骼肌miRNAs及其靶基因表达谱分析

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lonlinyang
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内蒙古绒山羊是内蒙地区的特色家畜品种,除了其优良的产绒性能,山羊肉也具有较高的营养价值,但目前对其肉质基因调控方面的研究较少。本研究以肌肉相关基因miR-1、miR-133、miR-24和脂肪相关基因miR-103、miR-122、miR-143及广泛表达的基因let7为研究对象,通过SYBR荧光定量PCR对各miRNA在绒山羊骨骼肌中的表达进行分析,并利用MTFP技术初步筛选各miRNA所调控的靶基因,之后建立绒山羊骨骼肌细胞系,选取miR-133构建表达载体并进行细胞转染试验,得到如下结果:1、研究所选取的7个miRNA在绒山羊骨骼肌中的表达量依次为:miR-1>miR-133>miR-24>let7>miR-143>miR-103>miR-122,其中miR-1和miR-133的表达规律相似,且肌肉相关miRNA比脂肪相关miRNA的表达量高,此外多数miRNA在成年公羊背最长肌中表达量最高,在成年母羊背最长肌中有最低表达量;2、利用MTFP技术批量筛选到98个靶基因,各miRNA具有各自的MTFP谱征,且不同miRNA在背最长肌和后腿肌中的靶基因表达量差别较小,通过测序所得到的SYNM、ALDOA、TLK2等靶基因候选基因参与细胞分裂、能量传递、信号转导等过程;3、建立了绒山羊骨骼肌细胞系,为后续细胞验证实验提供物质基础;4、对miR-133构建的pre-miR-133表达载体通过转染成功进入细胞,但在加工成成熟miR-133的过程中出现问题,未能实现miR-133在骨骼肌细胞中的过表达。
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