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本研究以开发中华鳖抗癌保健品为目的,分离纯化了中华鳖体内的抗癌物质维生素B-17;分别采用体外细胞培养和小鼠体内接种两种方法探讨了维生素B-17对人肝癌细胞HepG2生长的影响;并通过对荷瘤小鼠生化、免疫以及肿瘤块病理组化进行分析,探索了维生素B-17抗肿瘤效应的机制。1、利用高效液相色谱法(HPLC)对中华鳖中维生素B-17进行分离纯化,最终得到维生素B-17提取物。结果表明:每1Kg中华鳖肉中可分离纯化10.39mg维生素B-17,经HPLC检测,提取物纯度达到90.40%。2、利用台盼蓝染色拒染法(MTT)观察不同浓度维生素B-17对体外培养HepG2细胞的生长抑制作用,结果表明:一定范围浓度的维生素B-17与HepG2细胞生长抑制率呈正相关。体外试验中,当维生素B-17的添加量为1.3mg/mL时,HepG2细胞生长抑制率仅为5.62%;当添加量为10.5mg/mL时,细胞生长抑制率增加到30.99%;当添加42mg/mL时,细胞生长抑制率达到56.30%。3、通过对HepG2细胞接种荷瘤小鼠灌喂不同浓度的维生素B-17溶液,来进行维生素B-17体内抑制HepG2细胞试验,结果表明:一定范围内,随维生素B-17添加浓度的增加, HepG2细胞体内生长抑制作用越显著。其中,15mg/mL和30mg/mL维生素B-17添加对荷瘤小鼠瘤块生长抑制均不显著,抑瘤率仅为14.73%和31.95%;60mg/mL对肿瘤生长抑制作用最好,抑瘤率达到52.49%。此外,高浓度维生素B-17在抑制肿瘤细胞生长的同时,也对荷瘤小鼠的生长产生了显著的抑制效应,60mg/mL维生素B-17处理组荷瘤小鼠的平均日增重较对照组减小了1.07倍(P<0.01)4、利用HE染色和病理组化分析方法,探讨了不同浓度维生素B-17对HepG2荷瘤小鼠肿瘤病理的影响。结果表明:维生素B-17的添加对HepG2荷瘤小鼠肿瘤病理有一定的影响,随着维生素B-17添加浓度的不断增加,肿瘤中凋亡抑制基因(Survivin)和血管内皮生长因子(VEGF)的阳性表达率逐渐降低。当维生素B-17添加浓度为15mg/mL时,肿瘤中Survivin和VEGF的阳性表达率减小了21.8%(P>0.05)和13.64%(P>0.05);当添加浓度为30mg/mL时, Survivin和VEGF的阳性表达率减小了30.4% (P<0.05)和28.31%(P>0.05);而当添加浓度增大到60mg/mL时,Survivin和VEGF阳性表达率减小了35.60% (P<0.05)和50.83%(P<0.01)。5、通过分析HepG2荷瘤小鼠血清及肝脏内相关生理指标的变化,探讨不同浓度维生素B-17添加对荷瘤小鼠生理代谢的影响。结果表明:维生素B-17的添加对荷瘤小鼠生理有显著影响。与对照组相比,60mg/mL维生素B-17处理组血清蛋白含量下降了17.77%(P>0.05),脂蛋白脂酶活性下降了65.08% (P<0.01),游离脂肪酸含量下降了15.80%(P>0.05),血清白蛋白含量提高了16.19%(P>0.05)。并且60mg/mL维生素B-17处理组中总胆固醇含量、肝酯酶和苹果酸脱氢酶活性分别提高了85.56% (P<0.01)、58.60%(P<0.01)和22.99%(P<0.05)。6、通过分析HepG2荷瘤小鼠血清免疫指标,来探讨不同浓度维生素B-17添加对荷瘤小鼠的免疫性能的影响。结果表明:维生素B-17添加可以增强荷瘤小鼠的免疫力。15mg/mL和30mg/mL维生素B-17处理组的血清IgA含量较对照组提高了68.81%(P<0.05)和1.09倍(P<0.05),15mg/mL维生素B-17处理组的IgG含量与对照组相比差异不显著(P>0.05),30mg/mL维生素B-17处理组组的血清IgG含量较对照组提高了23.88%(P<0.05);60mg/mL维生素B-17处理组的血清IgA、IgG水平较对照组分别提高了225.25%(P<0.01)和38.47%(P<0.05)。补体C3、C4和癌胚抗原水平则受维生素B-17添加浓度影响不大。