【摘 要】
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人体体液中某种生物标志物含量过多、过少或者形态异常,往往是造成疾病的因素之一。现有的医学检测技术中核磁共振法检测灵敏度不高、质谱法及其联用技术由于仪器的庞大、样品前处理复杂不适用于便携式检测。光学技术在单分子和单细胞检测中有优势,但是荧光技术易受环境影响、红外光谱易受水干扰,而表面增强拉曼光谱(SERS)技术以其灵敏性高,适应性强的特点,正在被更广泛地应用于各种分子检测领域。本文对肌酐采用了无需内
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人体体液中某种生物标志物含量过多、过少或者形态异常,往往是造成疾病的因素之一。现有的医学检测技术中核磁共振法检测灵敏度不高、质谱法及其联用技术由于仪器的庞大、样品前处理复杂不适用于便携式检测。光学技术在单分子和单细胞检测中有优势,但是荧光技术易受环境影响、红外光谱易受水干扰,而表面增强拉曼光谱(SERS)技术以其灵敏性高,适应性强的特点,正在被更广泛地应用于各种分子检测领域。本文对肌酐采用了无需内标分子的直接SERS检测策略,对肌钙蛋白T(cTnT)采用了间接SERS检测策略,并取得了如下成果:(1)开发了一种用于快速、定量检测人体尿液中肌酐水平的SERS技术。通过调节团聚盐的类型以及盐和金溶胶(Ausol)的浓度来优化SERS对肌酐检测的灵敏度。通过开发一种尿液中肌酐的萃取技术,提高用于复杂生物基质分析的SERS检测选择性。将SERS定量检测结果与临床使用的酶法获得的结果进行比较,两种方法之间的平均差异仅为5.84%。我们的方法的检出限(LOD)为1.45 mg·L-1,而酶法为3.4 mg·L-1。这种新颖的方法能为早期的慢性肾脏疾病(CKD)提供诊断依据,为临床和法医分析提供高灵敏度的平台。(2)把肌钙蛋白T(cTnT)作为研究对象,发展了一种间接检测标志物的SERS免疫测定方法,借助其他信号分子来间接反映弱拉曼响应的cTnT抗原的存在。对纳米探针合成中是否需要添加壳层和支架分子的问题进行了详细的探讨。介绍了磁珠基底的合成,并对基于纳米探针粒子、cTnT抗原和磁性基底的“三明治结构”的SERS免疫分析做出详细研究。该方法为在实际样中定量检测cTnT含量奠定了基础,有望为早期诊断心梗发病提供准确有效的信息。
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