【摘 要】
：
无精子症是导致男性不育的重要因素,约占男性总人口的1%。在一些不育男性中,圆形精子细胞是睾丸活检中可见的最成熟的单倍体细胞,圆形精子细胞注射（Round spermatid injection,ROSI）技术的发展可以帮助他们拥有自己的后代。尽管ROSI技术在临床应用上已有诸多研究,但存在诸如着床率低、流产率高、活产率低等问题。为了提升ROSI胚胎发育效率,通过筛选178个小分子化合物,我们筛选到
论文部分内容阅读
无精子症是导致男性不育的重要因素,约占男性总人口的1%。在一些不育男性中,圆形精子细胞是睾丸活检中可见的最成熟的单倍体细胞,圆形精子细胞注射（Round spermatid injection,ROSI）技术的发展可以帮助他们拥有自己的后代。尽管ROSI技术在临床应用上已有诸多研究,但存在诸如着床率低、流产率高、活产率低等问题。为了提升ROSI胚胎发育效率,通过筛选178个小分子化合物,我们筛选到了三个小分子化合物A366、SGC0946和RG108能够显著提升小鼠ROSI胚胎的囊胚率,并对三个小分子的使用浓度和时间进行了优化。小分子化合物A366是H3K9me2甲基转移酶G9A的抑制剂,它可以将小鼠ROSI胚胎囊胚率和活产率提高约两倍。同时,孵育A366出生的ROSI活产小鼠成长期体重与产仔数正常,表明A366具备有效性和安全性,有极大的临床应用潜力。为了探索A366作用的分子机制,我们在小鼠ROSI胚胎中通过siRNA注射敲低和mRNA注射过表达G9A的编码基因Ehmt2,验证了冗余的H3K9me2和过多的H3K9me2甲基转移酶G9A对胚胎发育的负面影响,而A366的孵育可以帮助圆形精子注射胚胎克服这一障碍。为了分析A366作用后胚胎的表观遗传状态,我们还通过单细胞多组学测序发现A366孵育可以部分修复小鼠ROSI胚胎中异常的DNA甲基化、染色质开放和转录组位点,同时修复了部分初级合子基因组激活（Minor zygotic genome activation,Minor ZGA）基因的表达,并部分修复了微管组织中心（Microtubule organizing centers,MTOC）数量和原核形成的异常表型。为了进一步拓展A366的使用范围,我们尝试将A366与其他小分子化合物联合使用孵育小鼠ROSI胚胎,发现A366与SGC0946联合使用能进一步提升小鼠ROSI胚胎的囊胚率和活产率。我们还对B16细胞系孵育A366后进行研究,我们发现孵育A366后,B16细胞的H3K9me2修饰显著降低,同时部分初级合子基因组激活基因及微管相关基因的表达相对对照组有所提升,表明B16细胞系可作为一种研究A366作用机制的补充模型。综上所述,我们筛选到能有效提高小鼠ROSI胚胎发育效率的三个小分子化合物A366、SGC0946和RG108,并解析了 A366作用的机制,为临床上优化ROSI技术提供了一条途径。
其他文献
＜正＞关于劳动,习近平总书记强调,劳动是财富的源泉,也是幸福的源泉。人世间的美好梦想,只有通过诚实劳动才能发现;发展中各种难题,只有通过诚实劳动才能破解;生命中的一切辉煌,只有通过诚实劳动才能够铸就。劳动,创造了中华民族,造就了中华民族的辉煌历史,也将创造出中华民族的光明未来。习近平总书记关于劳动和劳动精神的思想,为我们正确认识劳动精神的科学内涵指明了方向。统编版新教材第二单元的编写就是以劳动为专
＜正＞《芣苢》《插秧歌》这两首诗是统编高中语文教材必修上册第二单元的第三篇课文。从整个单元编排来看,该单元人文主题是“劳动”,任务群则属于“实用性阅读与交流”。这两首诗虽说在主题上属于“劳动”,但按“单元提示”的说法应是“歌咏劳动的美好与欢乐”,与“实用性阅读与交流”任务群关系不大。那么,编者又为何将这两首诗编入这个单元呢?
背景:淋巴结转移（LNM）不仅是早期胃癌（EGC）治疗方案的决策因子,也是发生复发和进展最重要的危险因素。目前的临床评价方法尚不足以评价早期胃癌的淋巴结转移,导致患者经历不必要的过度治疗或治疗不足。本研究开发和验证一个基于qPCR完全定量DNA甲基化的诊断模型,以评估EGC中LNM的个体风险。方法:全表观组测序55例早期胃癌新鲜冰冻样本筛选淋巴结转移特异的甲基化标志。在432例EGC石蜡组织切片样
研究背景标准化特异性变应原免疫治疗（Allergen immunotherapy,AIT）是世界卫生组织推荐唯一能改变免疫机制的变态反应疾病对因治疗,也是唯一可能改变过敏性疾病自然进程的治疗方法。AIT能纠正失衡的Th1/Th2细胞免疫平衡,能抑制Th2型和增强Th1型细胞因子的分泌,从而抑制气道炎症,控制哮喘。高迁移率组盒蛋白 1（high mobility group box protein
研究背景:子宫具有重要的生物学功能,其中子宫内膜为胚胎的植入和生长发育提供了合适的微环境。严重的子宫内膜损伤,如医源性损伤、宫内感染和药物因素,通常会导致宫腔粘连（IUA）,甚至进一步发展为不育症,这已成为一个日益严重的公共健康问题。目前,临床上已有多种治疗方案,包括宫腔镜宫腔粘连切除术（TCRA）,物理屏障（避孕装置,子宫内气囊装置,Foley气囊等）和使用激素药物,可在临床治疗中改善子宫内膜损
背景与目的:法医学实践工作中,微量、混合以及降解等疑难检材日益成为检案工作的重点与难点问题。实现对疑难检材的有效检测及成功分型,对案件中未知个体（常为犯罪嫌疑人）的最终甄别与举证具有重要意义。此外,新型案件的层出不穷以及犯罪嫌疑人数量的逐年累积,也让传统的基于STR数据库比对的侦查方式陷入僵局。在常规STR分型无法获得满意的分型结果时,利用有限的生物检材获得更多嫌疑人相关的身份信息（例如容貌信息、
树立正确的劳动观念，理解劳动的意义和价值，主动积极劳动，对正在成长的高中生来说至关重要。诗歌是很好的劳动教育素材，在大单元背景下，可用情境体验的方式鉴赏诗歌，用讲故事的方式建立文本之间的联系，用写作的方式建立诗歌与生活的联系，层层深入，达到劳动教育的目标，实现语文学科核心素养的提升。
背景:现有研究和临床实践已表明,缺血性脑卒中后诱发局部神经炎症级联反应,极大地影响患者预后。越来越多的研究强调了肠道微生物群及其代谢物作为环境影响因素对缺血性脑卒中预后的重要性。但目前作为具有免疫活性的吲哚衍生物在缺血性卒中的作用研究仍不清楚。因此我们用急性大脑中动脉栓塞（Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO）小鼠模型评估吲哚丙酸（Indole-3-propi
研究显示盐酸布比卡因可导致糖尿病小鼠背根神经节的损伤,然而尚未有有效防治药物和措施。本研究通过使用黄芪多糖预处理,在动物和细胞水平探讨黄芪多糖对盐酸布比卡因所致糖尿病小鼠背根神经节神经元的保护作用及机制。目的1.通过在体动物实验,探索黄芪多糖预处理对盐酸布比卡因所致糖尿病小鼠背根神经节神经元的影响;2.通过离体细胞实验,探索黄芪多糖预处理对盐酸布比卡因所致高糖培养环境中ND7/23细胞的影响。方法
研究背景由创伤、肿瘤和其他原因造成的大面积骨缺损的修复仍然是骨组织工程中一个巨大的挑战。骨缺损区域的缺血和缺氧使种子细胞难以存活和分化,从而未能形成有效的组织再生。因此,使用释氧生物材料是近年来开发的一种解决方案,以确保向骨缺损区持续供应营养物质和氧气。但是,目前固体无机过氧化物的应用,包括过氧化钙、过碳酸钠和过氧化镁,仍然面临一些棘手的问题,如降解速度过快,机械强度差,成型困难,需要二次加工等。