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目的:探讨miR-155在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)介导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬中的作用。方法:1.采用浓度为100μg/m L的ox-LDL对HUVECs作用处理,分别在不同的时刻收集细胞,用电镜观察HUVECs内的超微改变,同时采用qRT-PCR技术检测LC3和p62的mRNA的表达及mi R-155的表达,用Western blot技术测定LC3-II及p62的蛋白水平,初步观察ox-LDL对HUVECs自噬水平及miR-155水平的改变。2.将HUVECs分为正常对照组,ox-LDL组,ox-LDL+miR-155mimic组,ox-LDL+miR-155inhibior组及ox-LDL+miRNA negative control(NC)组五个试验组。其中正常对照组不加任何干扰,而ox-LDL组,ox-LDL+miR-155mimic组,ox-LDL+miR-155inhibior组及ox-LDL+miRNA NC组则用ox-LDL(100μg/m L)进行诱导刺激。用电镜观察各组细胞内的自噬体的形状和数量,用qRT-PCR方法测定LC3和p62的mRNA的水平,用Western blot技术检测LC3-II及p62的蛋白表达水平。结果:1.我们用100μg/m L的ox-LDL处理HUVECs 6小时、12小时后,电镜结果显示细胞内出现较多的自噬体及自噬溶酶体,qRT-PCR技术显示LC3m RNA表达上调,而p62mRNA表达下调,western blot结果显示LC3-II/GAPDH的水平上升,而p62/GAPDH的水平下降。由于细胞内LC3上调及p62下调在6小时的时候最明显,因此,我们将6小时作为后续实验的作用时间点。此外,qRT-PCR结果显示ox-LDL处理后的细胞内miR-155的表达增加。2.用miR-155mimic,miR-155inhibior及miR-155 NC对细胞进行转染,并用100μg/mL ox-LDL处理细胞6小时后,我们发现,上调miR-155的表达后,细胞内自噬体及自噬溶酶体的数量明显增加,同时LC3的表达水平提高,p62的表达程度降低,而下调miR-155的水平后,细胞内自噬体的数目减少,LC3表达降低,p62的表达水平升高。结论:ox-LDL能够介导HUVECs自噬,并上调miR-155表达;miR-155能够调节ox-LDL诱导的HUVECs自噬。