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背景:细菌生物膜(Biofilm,BF)是导致细菌感染性疾病慢性化、严重化的重要原因,形成BF的细菌比悬浮状态的细菌对抗生素表现出更大的抗药性。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)利用BF的形成来阻碍抗生素的杀伤作用,是感染治疗的主要障碍之一。因此,抑制细菌BF对于抗生素发挥抗菌作用非常重要。穿心莲内酯磺化物(Andrographolide sulfonated,AS)是一种天然生物活性成分,因其广泛的药理活性而备受关注。它是从穿心莲中提取的穿心莲内酯磺酸盐的有效成分。具有抗病毒、抗炎、抗菌、免疫调节等药理活性。本研究探讨AS对抗MRSA及其生物膜的抑制作用,并探讨机制,为MRSA及其生物膜的临床治疗提供新方法。方法:首先采用微量稀释法测定AS的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC),并采用生长曲线法测定不同浓度AS对MRSA 24h生长状况的影响;采用XTT还原试验测定AS对成熟MRSA-BF内活菌数的影响;同时用扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM)和激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)观察给药后成熟MRSA-BF的形态特征;此外,通过BF渗透实验检测AS对MRSA-BF的渗透作用;Real Time PCR检测AS干预对BF形成相关基因,如毒力因子sarA,调节基因cidA和群体感应系统(Quorum sensing,QS)相关基因luxS的mRNA表达水平的影响。结果:微量稀释法测得AS对MRSA的MIC为50mg/ml;生长曲线分析结果发现,AS对MRSA 24h生长具有一定的抑制作用,且这种抑制作用呈现一定的剂量依赖关系;XTT还原试验结果显示:AS在0.39—50mg/ml的浓度范围内可以显著抑制MRSA-BF的形成,其中AS在3.125—50mg/ml的浓度范围内对MRSA-BF的形成具有极显著的抑制作用。CLSM观察发现:AS作用后,成熟MRSA-BF厚度减小,活菌荧光信号减弱,死菌荧光信号强度增强,同时胞外基质的生成被抑制。扫描电镜结果发现:BF结构消失,菌体大小不一、散乱分布,细胞分裂异常。BF渗透实验结果显示:AS干预后BF结构被破坏,使得抗生素能有效透过滤膜,从而发挥抗菌作用。RT-PCR检测结果发现:AS在1/2MIC浓度下,可以显著的下调MRSA-BF形成相关的毒力因子SarA,调节因子cidA和QS系统相关基因luxS等基因的mRNA表达水平,且与Van组相比,AS在1/2MIC浓度下luxS和cidA的抑制作用更为显著。结论:AS对MRSA及其BF有抑制作用,其机制主要是抑制MRSA-BF相关的毒力因子SarA,调节因子cidA和QS系统相关基因luxS等基因的表达,并干扰胞外基质的合成。