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[目的]
筛选与结直肠癌密切相关的miRNAs作为候选标志物，验证其在结直肠癌患者血清及肿瘤组织中的表达特征，评价血清中候选miRNAs表达对于结直肠癌诊断的特异性和敏感性，为血清miRNAs应用于结直肠癌的无创诊断提供实验依据。
[方法]
1.利用在线疾病-基因库OMIM检索与结直肠癌发生发展相关的基因，通过在线miRNAs预测软件TargetScan及相关文献检索，筛选5个可能参与调控结直肠癌相关基因的miRNAs分子，作为候选分子标志物。
2.建立基于stem-loop RT实时荧光定量PCR技术的miRNAs检测平台，确定最佳的miRNAs标准化分析方法。
3.采用实时荧光定量PCR技术对12例结直肠癌与癌旁组织、50例结直肠癌患者及27例正常对照血清中候选miRNAs的表达水平进行检测;分析血清与肿瘤组织中miRNAs表达的相关性，探讨结直肠癌血清中miRNAs的表达特点及其与临床、病理特征的关系，ROC分析方法评价血清miRNAs表达对结直肠癌诊断的灵敏度和特异性。
[结果]
1.结合生物信息学分析及文献检索，初步选定mir-16、mir-21、mir-29a、mir-92a、mir-143作为结直肠癌特异性miRNAs候选标志物。
2.mir-16、mir-21、mir-92a在结直肠癌组织和患者血清中表达水平明显高于正常对照(P＜0.05)，mir-29a、mir-143在肿瘤组织和患者血清中表达水平均无明显改变(P＞0.05)，结直肠癌组织和血清中miRNAs的表达趋势具有一致性。
3.血清mir-16、mir-21、mir-92a在肿瘤发生的不同部位(结肠、直肠)、不同病理分化程度(低分化、中分化)及有无淋巴结转移情况下的表达水平均无显著性差异(P＞0.05);结直肠癌患者血清mir-16、mir-92a在肿瘤切除术后7天表达水平明显下降(P＜0.05)，术后血清mir-21表达水平无显著变化(P＞0.05)。
4.ROC曲线分析结果显示，血清mir-16、mir-21及mir-92a的曲线下面积(AUC)分别为0.835、0.691、0.796，血清mir-16对结直肠癌的诊断价值最高;若以其约登指数最大时的表达水平作为诊断临界值，血清mir-16、mir-21及mir-92a对结直肠癌诊断的敏感度分别为72％、94％、76％，特异性分别为85％、44％、58％，3个miRNAs联合诊断的敏感度和特异性分别为88％和85％。
[结论]
mir-16、mir-21、mir-92a在结直肠癌组织与血清中表达水平明显升高，血清和组织中miRNAs表达趋势一致，术后检测血清mir-16和mir-92a表达水平变化有助于病情监测和预后评估。血清mir-16对结直肠癌诊断的特异性较好，而mir-21则是灵敏度较好的指标;mir-16、mir-21、mir-92a联合检测对结直肠癌的诊断具有良好的灵敏度和特异性，有望作为新的肿瘤标志物用于结直肠癌的无创诊断及病情监测，具有较高的临床应用价值。