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目的：探讨广西肝癌高发区乙型肝炎病毒(HBV)基因型和基因亚型的分布特征及与广西肝癌家族聚集的相关性。方法：按相同的性别、年龄(±5)岁、相同的生活环境配对,收集2007年7月～2012年7月广西肝癌高发区39个肝癌高发家族(实验组)和59个无癌家族(对照组)中的成员各103例,入选者均为HBV感染者并且HBV DNA≥100IU/ml者。应用型特异性引物巢式PCR以及测序的方法进行基因型的检测,应用巢式PCR以及聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术进行基因亚型的检测分析。结果：(1)肝癌高发家族成员的HBV DNA基线水平显著高于无癌家族成员(P=0.008),HBV DNA≥105copies/ml病毒高载量的成员在肝癌高发家族和无癌家族中分别为35.9%和17.5%,差异有统计学意义(P=0.003)。(2)研究对象共检出HBV基因型有B、C、B/C混合、D四种,分别占30.6%、59.2%、4.4%、2.4%,以B、C基因型为主,其中C型为优势基因型。肝癌高发家族和无癌家族成员在B、C、B/C混合、D四种基因型中所占比例分别为31.1%、63.1%、1.9%、1.9%和30.1%、55.3%、6.8%、2.9%,均无显著差异(P>0.05)。HBeAg阳性率C高于B基因型(P=0.000),B、C基因型在性别、年龄、民族、HBV DNA水平上均无统计学差异(P>0.05)。在肝癌高发家族中,各级亲属间B、C基因型的分布比较均无统计学差异(P>0.05)。在肝癌高发家族成员中,男性及>≥30岁的C基因型比例明显高于无癌家族成员(P<0.01),女性、<30岁、民族、HBeAg阳性及HBeAg阴性的C基因型比例在两组中没有显著差异(P>0.05)；B基因型无论从性别、年龄分层、民族还是HBeAg状态上比较两组均无统计学差异(P>0.05)。(3)研究对象检出各基因亚型比例为B2(30.6%),C1(38.8%),C2 (20.4%), B2C1 (2.9%), B2C2 (1.5%),未发现其他亚型,B2和C1亚型占绝大多数。肝癌高发家族和无癌家族成员在B2、C1、C2、B2C1、B2C2亚型中所占比例分别为31.1%、41.7%、21.4%、1.0%、1.0%和30.1%、35.9%、19.4%、4.9%、1.9%,两组无显著差异(P>0.05)。HBeAg阳性率C1高于B2亚型(P=0.000)。B2、Cl、C2亚型在性别、年龄、民族、HBV DNA水平上无统计学差异(P>0.05)。在肝癌高发家族中,B2、C1、C2亚型在各级亲属间的比例无统计学差异(P>0.05)。肝癌高发家族成员中,男性及≥30岁的C1亚型比例明显高于无癌家族成员(P<0.05),女性、<30岁、民族、HBeAg阳性及HBeAg阴性的C1亚型比例在两组中没有统计差异(P>0.05)。B2及C2亚型比例无论从性别、年龄分层、民族还是HBeAg状态上比较两组均无统计学差异(P>0.05)。结论：HBV的复制水平与广西肝癌高发区肝癌家族聚集密切相关。广西肝癌高发区HBV基因型以B、C基因型为主,C型占绝大多数,有少量的B／C混合型和D基因型。B基因型其亚型全部为B2亚型,C基因型有C1和C2亚型,以C1亚型为主,B2和C1亚型占绝大多数。各基因型和亚型的分布在肝癌高发家族和无癌家族中没有明显差异。但男性及≥30岁的C基因型和C1亚型成员可能可以增加患肝癌的风险。目的：探讨广西肝癌高发区乙型肝炎病毒(HBV)基因组基本核心启动子(BCP)区和前C区基因突变对肝癌家族聚集的影响。方法：收集2007年7月～2012年7月广西肝癌高发区39个肝癌高发家族中103例作为试验组,为了尽可能避免混杂因素对研究对象的影响,在相同地区59个无癌家族中选择与试验组年龄、性别、生活环境相匹配的103例作为对照组。将研究对象按民族分布分为壮族组(96例)、瑶族组(52例)和汉族组(58例)。按HBeAg阳性及阴性分为阴性组(140例)和阳性组(66例)。按是否突变分为突变组和未突变组。按亲属分级将肝癌高发家族成员分为一级亲属组(48例),二级亲属组(32例),三级及以上亲属组(23例)。所有研究对象均为HBV感染者,并且HBV DNA≥100IU/ml,采用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV DNA BCP区／前C区的基因片段并测序分析,检测HBV DNA BCP区和前C区的基因突变情况,并分析BCP区和前C区的基因突变与HBV基因型的关系。结果：(1)肝癌高发家族成员HBV DNA基线水平和HBV DNA≥ 105copies/ml病毒高载量的例数均高于无癌家族成员(P<0.01)。(2)HBV DNA BCP区／前C区基因突变发生频率在前十位的位点为A1762T、G1764A、T1858、A1775G、C1856T、G1896A、T1753C、A1846T、T1803G、G1898A,它们在肝癌高发家族和无癌家族组成员中的检出数分别为74.8%、70.9%、52.4%、46.6%、41.7%、34.0%、22.3%、18.4%、14.6%、6.8%和53.4%、46.6%、42.7%、35.0%、22.3%、15.5%、9.7%、9.7%、7.8%、3.9%。它们有多种突变组合形式,以联合突变为主,A1762T/G1764A双突变在联合突变中最常见。在十个突变位点中,其中BCP区的A1762T、G1764A、T1753C三个位点和前C区的C1856T、G1896A两个位点的突变率在肝癌高发家族成员中均显著高于无癌家族成员(P<0.05),此外,肝癌高发家族成员组和无癌家族成员组中联合突变及A1762T/G1764A双突变的检出率差异均有统计学意义(P<0.01)。将单因素有统计学差异的HBV DNA≥105copies/ml、联合突变、A1762T/G1764A双突变、A1762T、G1764A、T1753C、C1856T和G1896A等指标进行Logistic多因素分析显示:HBVDNA≥105copies /ml(P=0.000,OR=18.637, 95%CI:6.014-57.757)、A1762T / G1764A双突变(P=0.009,OR=3.388, 95%CI:1.360-8.441)、C1856T (P=0.000, OR=10.270, 95%CI:3.638-28.996)和G1896A (P=0.000, OR=7.597, 95%CI: 2.720-21.213)是肝癌高发的独立危险因素。(3)A1762T、G1764A、C1856T、T1753C、G1896A的突变率在壮族、瑶族、汉族组中没有统计学差异(P>0.05)。A1762T、G1764A、C1856T和G1896A位点HBeAg阴性组的突变率显著高于HBeAg阳性组(P<0.01),而T1753C在两组中的突变率无统计学差异(P>0.05)。突变组A1762T、G1764A和G1896A的HBV DNA复制水平比未突变组低(P<0.01),而T1753C和C1856T在两组中的HBV DNA复制水平无统计学意义(P>0.05)。在肝癌高发家族中,一级亲属组A1762T及G1764A的突变率高于二级亲属组(P<0.05),各级亲属在C1856T、T1753C、G1896A的突变率无统计学差异(P>0.05)。(4)在BCP区突变中,C基因型A1762T、G1764A和T1753C位点的突变率显著高于B基因型(P<0.05),而A1775G和T1803G突变率在B、C基因型中无统计差异(P>0.05)；在前C区突变中,B基因型的C1856T突变率显著高于C基因型(P=0.000),而A1846T、T1858C、G1896A、G1898A的突变率在B、C基因型中没有统计学差异(P>0.05)。(5)在B基因型中,BCP区A1762T、G1764A、A1775G、T1753C.T1803G的突变率在两组成员中比较没有统计学意义(P>0.05),前C区C1856T位点的突变率在肝癌高发家族成员中的比例高于无癌家族成员(P=0.032),其余位点A1846T, T1858C、G1896A、G1898A的突变率在两组成员中无显著差异(P>0.05)；在C基因型中,BCP区A1762T、G1764A、T 1753C、T1803G的突变率在肝癌高发家族成员中的比例高于无癌家族成员(P<0.05),A1775G的突变率在两组成员中无显著差异(P>0.05),前C区A1846T、G1896A的突变率在肝癌高发家族成员中的比例高于无癌家族成员(P<0.05),C1856T、T1858C、G1898A的突变率在两组成员中无显著差异(P>0.05)。(6)在BCP区突变中,C1亚型A1762T、G1764A和T1753C位点的突变率均高于B2亚型(P<0.05),C2亚型A1762T和G1764A突变率高于B2亚型(P<0.05),C1、C2亚型在A1762T、G1764A和T1753C位点的突变率无统计学差异(P>0.05),B2、C1、C2亚型间A1775 G和T1803G的突变率无统计学差异(P>0.05)。在前C区突变中,C1856T位点的突变率C1、C2、B2依次增加,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05),C2亚型G1898A位点的突变率高于C1亚型(P<0.05), B2、C1、C2亚型间A1846T、T1858C和G1896A的突变率无统计学差异(P>0.05)。(7)在B2亚型中,BCP区A1762T、G1764A、A1775G、T1753C、T1803G 5个位点的突变率在两组成员中比较没有统计学意义(P>0.05),前C区C1856T位点的突变率在肝癌高发家族成员中的比例高于无癌家族成员(P=0.032),其余位点A1846T、T1858C、G1896A、G1898A的突变率在两组成员中无显著差异(P>0.05)。在C1亚型中,BCP区A1762T、G1764A、T1753C、T1803G的突变率在肝癌高发家族成员中的比例均高于无癌家族成员(P<0.05),而A1775G的突变率无统计差异(P>0.05),前C区A1846T、G1896A、 C1856T、T1858C、G1898A5个位点的突变率在在两组成员中无显著差异(P>0.05)。在C2亚型中,BCP区/前C区10个位点的突变率在两组成员中均无显著差异(P>0.05)。结论：(1)广西肝癌高发区HBV DNA水平和HBV DNA BCP区/前C区中的A1762T、G1764 A、T1753C、C1856T和G1896A基因位点的突变均与广西肝癌高发区肝癌家族聚集密切相关。联合突变是主要的突变形式,联合突变可能发挥协同的作用,T1762／A1764双突变可能对肝癌的高发具有重要的预测价值。(2)HBV DNA BCP区/前C区的突变可能使HBeAg减少或消失,而且突变组HBV DNA的水平低于未突变组的HBV DNA的水平,广西肝癌高发区肝癌家族聚集的发生可能不是通过突变提高HBV DNA复制水平的机制而起作用的。(3)C基因型和C1亚型以BCP区突变为主,B基因型和B2亚型以前C区突变为主。C基因型和C1亚型合并BCP区突变以及B基因型和B2亚型合并前C区突变均有可能增加患肝癌的风险。