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非O157产志贺毒素大肠杆菌（Shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC）和单增李斯特菌是近年来导致人类疾病的两大主要病原菌。本文研究了359株食品（n=99）、人（n=105）和动物源（n=155）非O157产志贺毒素大肠杆菌的主要毒力基因（志贺毒素基因stx1和stx2，凝集素基因eae和溶血素基因hlyA）、血清型和猴肾细胞毒性（所选菌株）。然后从此359株菌株中选取272株进行PCR电喷雾电离质谱（PCR Coupled to Electrospray Ionization-Mass Spectrometry, PCR-ESI-MS）检测，测定看家基因（mdh和mutS）的五个片段和毒力基因（stx1、stx2、eae、hlyA和aggA）的六个基因片段的碱基组成，从而对它们进行检测鉴定和分型。另外，对来源于2008年零售肉中的单增李斯特菌进行了耐药性和分子血清组测定；通过对单增李斯特菌中的主要毒力基因包括inlC、inlJ、llsX和inlA以及流行克隆（EC）的研究，并结合脉冲场凝胶电泳（Pulsed-Field Gel Electrophoresis, PFGE）探讨了它们以及另外来源于2003年马里兰地区鸡肉和蔬菜中的30株单增李斯特菌的致病潜力。得出以下主要结果：（1）在359株非O157STEC中共检出18种stx基因型，前六种分别为stx1a（61%）、stx2a（9%）、stx2dact（8%）、stx1a+stx2a（7%）、stx2c（2%）和复合变体stx2a+stx2dact（2%）。与O157STEC相比，stx2c和复合变体的比例较低。主要有四种eae变体eaeβ、eaeε1、eaeγ1和eaeγ2/θ，并且eae变体和血清型尤其是鞭毛抗原类型有很大的关系。stx2变体在eae阳性和阴性菌株中分布有很大差别：eae阳性菌株中主要含stx2a，而stx2变体在eae阴性菌株中较多样化，且stx2dact主要存在于eae阴性菌株中。猴肾细胞毒性测试结果表明含stx2b、stx2e或stx2g的菌株的毒性较低，而含stx2a、stx2c或stx2dact的菌株的毒性普遍较高。（2）不同来源的菌株所含的血清型和毒力基因有很大差异。人源菌株中“六大O抗原”O26、O111、O103、 O145、 O121和O45占84%。动物源（主要为牛）菌株中O111、O103和O26占91%。而对于食源性菌株，不属于“六大O抗原”的菌株占98%。关于毒力基因，在99株食品源菌株中，大多数只含Stx2（67%），21%只含Stx1，11%同时含有Stx1和Stx2。只有一株含有eae,将近一半（45%）的菌株含有hlyA。相反，105株人源菌株中， Stx1占67%，而Stx2只占21%， Stx1+Stx2占12%，但大多数含有eae （85%）和hlyA （82%）。关于毒力基因型， stx1a+eae+hlyA在人源菌株中最流行占57%；而食源菌株中，毒力基因型呈现多样化，最常见的是stx2dact，只占不到18%。（3）食源性菌株中发现曾引起人类疾病的血清型： O113:H21、O91:H21、O104:H21、O22:H8、O45:H2、O73:H18、O113:H21、O116:H21、O121:H19、ONT:H2、ONT: H10和O91:H14，且这些菌株大多含有stx2a和（或）stx2dact+hlyA，有些菌株与临床菌株表现出一样高的猴肾细胞毒性。这些菌株具有致病潜力，需要引起重视。（4）关于PCR-ESI-MS，首先选取164株典型菌株在96孔板（Foodborne Bacteriav2）上测试从而建立毒力基因（变体）和血清型的数据库，然后对剩余的108株典型菌株进行测试，从而评估板子的检测和分型能力。对108株非O157STEC毒力基因的检测特异性如下：100%（stx1、eae和aggA），对于stx2和hlyA来说分别是99%和96%。另外，此方法还能够分辨出stx1的主要变体(stx1a和stx1c)，对于stx2基因来说，它能够把与严重疾病高度相关的stx2变体(stx2a/stx2c/stx2dact)和其他变体(stx2b、stx2e和stx2g)区分开。对于存在于同一株菌中的多个不同stx1或stx2基因变体也能够检测出来。此外，由于以下几种重要血清型含有独特的看家基因碱基组成，因此此方法还能将它们分别辨别出来： O91:H14、O103:H25、O145:H28/NM、O113:H21和O104:H4。另外，由于菌株所含有的看家基因和毒力基因碱基组成差异，此方法能够将菌株分为具有不同致病潜力的组。这种高通量的方法在STEC的检测、鉴定和分型中非常有前景，尤其是对具有高致病潜力的STEC的筛选中更加有优势。（5）来源于2008年近700份生肉中，李斯特菌占20%，共检出三个种：单增李斯特菌（10%）、威尔斯李斯特氏菌（9%）和英诺克李斯特氏菌（2%）。关于单增李斯特菌，最常见的血清型为1/2a,3a （33%），以下依此为1/2c,3c （27%）、1/2b,3b,7（22%）、4b,4d,4e （16%）和4a,4c （2%）。世系II菌株（60%）比世系I菌株（39%）常见，只发现一株（1%）属于世系III。大多数单增李斯特菌株对所测的抗生素敏感，但表面出对四环素（4.5%）、环丙沙星（4.5%）和呋喃咀啶（10.5%）较低的耐药率。另外，61%和85%的菌株对环丙沙星和呋喃咀啶中介耐药。未发现多重耐药（耐两种及以上抗生素）菌株。世系I（3/26）中比世系II （9/40）中含有较少的耐药菌株。（6）对来源于2008年马里兰零售肉中的67株单增李斯特菌和来源于2003年马里兰州的30株单增李斯特菌（24株来源于生鸡肉，6株来源于蔬菜）的毒力基因分析结果表明，除了一株世系III菌株，所有单增李斯特菌都含有inlC和inlJ；李斯特菌溶血素S （LLS）阳性菌株中大多数（11/12）属于世系I，而另外的一株菌株属于世系III。五个属于分子血清组4b,4d,4e的菌株（两个来源于火鸡肉、三个来源于蔬菜）属于流行I （ECI）。共发现有四种与分子血清组相关的突变类型，可导致inlA终止密码子提前。PFGE和inlA序列分析结果高度相似，且分别在分子血清组1/2a,3a和4b,4d,4e中发现有不同致病潜力的菌株组。来源于零售肉和蔬菜中的一些菌株属于ECI，含有inlC、 inlJ和LLS，且具有功能性的InlA，这表明他们可能会引起人类疾病。