本课题在体外转录翻译系统和稳定表达HBV的肝癌细胞中,研究La及其突变对HBVRNA的结合力、转录、翻译和病毒复制的影响。制备野生型La和突变体DeL1、DeL2、DeL3;构建adr HBV全基因、ORF-P、ORF-S、ORF-C和ORF-X真核表达质粒。应用电泳迁移率变动分析实验和体外转录翻译系统,研究La及其突变体对HBV RNA的迁移率、HBV及ORF转录和HBsAg、HBeAg表达的影响;在HepG2.2.15细胞内,采用SiRNA干扰细胞内La的表达,探讨La与HBV蛋白表达和复制的关系。结果发现:野生型La使HBV RNA迁移率显著降低且亲和力最强,不同位点的突变影响亲和结合力,RRM3缺失影响最显著;野生型La上调HBV全基因、P基因、C基因转录和HBsAg表达,抑制X基因转录和HBeAg表达,DeL2显著抑制X基因转录,DeL2和DeL3促进HBeAg表达;细胞内HBsAg、HBeAg和:HBV DNA含量与La的表达呈正相关。表明,RRM3与La的结合功能有关,RRM3和KRM2参与HBV转录和翻译启动的调控,La与HBV之间有密切相互作用关系,为寻找新的抗HBV药物靶点提供重要的实验依据。