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人体内雌激素靶器官、某些非雌激素靶器官及恶性肿瘤细胞中均存在雌激素受体(estrogen receptor,ER),雌激素通过与ER结合来发挥其生物学作用。肝癌的发生机制目前尚未完全阐明,研究表明人类及哺乳动物肝脏均含有雌激素受体(ER)。肿瘤的发生、发展是十分复杂的过程。ERa表达水平的变化以及突变与变异与某些恶性肿瘤的发生发展有关。ER分ERa和ERβ两个亚型,Nilsson M认为ER基因多态性(gene polymorphismss)可能导致基因在转录、翻译水平失调,导致ER表达、功能异常。在ERa基因上游有多种多态性位点存在,其中PvuII和XbaI 2个限制性片段长度多态性的确切酶切位点已被确定,其位于1号内含子,1号内含子含有增强子、启动子等重要序列,其中发生的点突变有可能影响到ERa的表达与功能。而且ERa基因上游1Kb处存在T(thymine),A(adenine)重复序列,它属于基因的调控区,对基因表达起调控作用。ERβ基因常见多态性位点有5’G1082A、3’UTR A1730G和5号内含子存在C(cytosine)和A(adenine)重复多态性,其重复次数不同与某些与激素水平相关疾病有关。我们研究ER基因多态性在原发性肝癌组与非肝病组中的分布情况,旨在从分子遗传学角度,探讨ER基因多态性与原发性肝癌的关系。第一部分雌激素受体基因单核苷酸多态性(SNP)与原发性肝癌的关系目的:探讨西南地区雌激素受体基因多态性与原发性肝癌的关系。方法:选择西南地区100名原发性肝癌患者为实验组,100名非肝病人群作为对照组。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphisms,PCR-RFLP)的方法分析ERa基因1号内含子PvuⅡ、XbaⅠ多态性,ERβ基因RsaⅠ、AluⅠ多态性。观察ER基因多态性在实验组与对照组中的分布,分析各基因型、等位基因型及单倍体型特征,比较ER基因各基因型与年龄、性别的关系。结果:实验组ERa基因PvuII基因型PP,Pp,pp频率与对照组相比差异有显著性(χ2=14.963,P=0.001)。P基因型频率实验组为32.0%,对照组为49.0%,OR值:0.490(95%CI=0.326～0.735),P=O.001;X基因型频率实验组为34.5%,对照组为20.5%,OR值:2.043 (95%CI=1.302～3.205),P=0.002。PvuII和XbaI限制性片段长度多态性在两组中均呈多态性分布。实验组ppXx基因型构成比(33%)高于对照组(5%),而PPxx、Ppxx基因型构成比(2%、22%)低于对照组(9%、38%)。原发性肝癌患者ERa基因不同基因型与年龄、性别的比较,差别无统计学意义。实验组ERβ基因RsaI基因型RR,Rr,rr频率与对照组相比差异没有显著性(χ2=11.379,P=0.003)。R等位基因型频率实验组为35.0%,对照组为51.0%,OR值:0.517(95%CI=0.346～0.773),P=O.001;A等位基因型频率实验组为20.5%,对照组为11.0%,OR值:2.086(95%CI=1.191～3.654), P=0.009。RsaI和AluI限制性片段长度多态性在两组中差异有显著性。两组ERβ基因不同基因型年龄、性别差别无统计学意义。结论: ERa、ERβ基因多态性与原发性肝癌有关。X等位基因可能是其危险因素, P等位基因可能是其保护因素,R等位基因可能是其保护因素, A等位基因可能是其危险因素。ppXx基因型可能是原发性肝癌的潜在危险因素。原发性肝癌患者ER基因型与年龄、性别无相关性。第二部分雌激素受体基因重复序列多态性与原发性肝癌的关系目的:研究雌激素受体基因二核苷酸重复序列多态性与原发性肝癌的关系。方法:选择西南地区100名原发性肝癌患者为实验组,100名非肝病人群作为对照组。对雌激素受体a基因上游的高变区二核苷酸(TA)重复序列和雌激素受体β基因5号内含子的高变区二核苷酸(CA)重复序列进行纯化、克隆和序列分析,研究TA重复序列和CA重复序列多态性在实验组与对照组中的分布情况,将两种多态性与年龄、性别比较。结果: ERa基因共分离出7种等位基因,其(TA)n重复数目为11至17,对照组和实验组的(TA)n重复序列等位基因的分布频率不同,差异有显著性(χ2=13.036,P=0.042)。再用Fisher’s确切概率法比较两组各等位基因的分布频率:对照组中最常见的等位基因为TA14;实验组TA13等位基因频率(30%)高于对照组(14%),差异有显著性(P=0.006), OR= 2.633 (1.296～5.347);TA15等位基因频率(18%)低于对照组(31%),差异有显著性(P=0.033),OR=0.489(0.252～0.948)。ERβ基因共分离出9种等位基因,其(CA)n重复数目为16～24。对照组和实验组的(CA)n重复序列等位基因的分布频率不同,差异无显著性(χ2=9.554,P=0.298)。以重复次数n≤20作为SS型,n>20为LL型。SS基因型频率实验组为67%,对照组为53%,OR值:1.800倍(95%CI: 1.015～3.192)。再比较两组病人SS型和LL等位基因型的分布频率,差异有显著性(χ2=4.083,P=0.043)。原发性肝癌患者ER基因不同等位基因型与年龄、性别无统计学意义。结论: ERa基因TA、ERβ基因CA重复序列多态性与原发性肝癌有关。ERa基因TA13等位基因可能是原发性肝癌的危险因素,ERa基因TA15等位基因可能是其保护因素。ERβ基因SS型等位基因型可能是原发性肝癌的危险因素。原发性肝癌患者ERa基因TA等位基因型和ERβ基因CA等位基因型与患者的年龄、性别无相关性。