玉米青枯病生防菌筛选及其应用技术研究

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本研究筛选玉米青枯病的生防菌,研究生防菌的应用技术,并进行生防菌鉴定和部分生物学特性研究。从河南省许昌、平顶山、新乡等地采集的146份小麦、油菜等植物样本中共分离出1193株细菌,通过对玉米青枯病病原菌禾谷镰刀菌、禾生腐霉菌和肿囊腐霉菌的平板对峙培养和对玉米青枯病的盆栽防效试验筛选出三株生防细菌G28-6、K3-3和K18-5。三株生防菌在皿内均可以抑制玉米青枯病病原菌的菌丝生长,在盆栽试验中对玉米青枯病有一定的防治效果,同时能够促进玉米种子发芽和根系发育。为了探索生防菌G28-6、K3-3和K18-5的应用技术,本研究进行三株生防菌的处理方法、处理浓度、处理时期、单独处理和混合处理对玉米青枯病的防治效果。结果三株生防菌G28-6、K3-3和K18-5的浸种时间为8h、处理浓度为108cfu/ml时对玉米青枯病的防治效果最高;灌注处理中灌注处理两次比处理一次效果显著;生防菌的混合处理比单独处理效果好,G28-6和K3-3的混合处理对玉米青枯病的防治效果显著,其防效达到64.7%。同时,这三株生防菌均在玉米根际土壤和玉米根部具有良好的根际定殖能力,在大田小区试验中,播种30d时在玉米根际土壤和玉米根部的定殖密度均各达到3.0×10~4 cfu/g soil和9.0×10~5 cfu/g root以上,播种60d时在玉米根际土壤和玉米根部的定殖密度均各达到2.0×10~4cfu/g soil和3.5×104cfu/g root以上。通过形态特征、生理生化特性和16SrDNA序列同源性分析,对三株生防菌进行了鉴定。结果G28-6为革兰氏阴性菌,兼性厌氧,具有运动性,鉴定G28-6为桔黄假单胞菌(Pseudomonas aurantiaca),K3-3为革兰氏阴性菌,兼性厌氧,具有运动性,鉴定为绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis),K18-5革兰氏阳性菌,兼性厌氧,具有运动性,鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。并对三株生防菌的部分生物学特性进行了研究。G28-6的适宜生长时间为20-48h,最适生长温度为28℃,适宜培养液pH为6.5-8; K3-3的适宜生长时间为20-48h,最适生长温度为28℃,适宜培养液pH为6-9 ;K18-5的适宜生长时间为20-60h,最适生长温度为28℃,适宜培养液pH为5-7.5。三株生防菌均能利用多种碳源和氮源。
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