高迁移率族蛋白B1预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响

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第一部分:不同剂量高迁移率族蛋白B1预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响目的:评价不同剂量高迁移率族蛋白B1(High mobility group box1,HMGB1)预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(Spinal cordischemia/reperfusion injury,SCII)的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠24只,随机分为:缺血再灌注损伤对照组(IR组,6只)、HMGB120ng预处理组(H20组,6只)、HMGB150ng预处理组(H50组,6只)、HMGB1200ng预处理组(H200组,6只)。在缺血前18h,IR组经侧脑室给予无菌生理盐水,H20组、H50组及H200组分别经侧脑室注射不同剂量重组HMGB1。建立大鼠SCII模型,阻断腹主动脉45min后行再灌注。于再灌注24h评价大鼠后肢运动神经功能后,采集血样检测循环中肿瘤坏死因子-α(Tumornecrosis factor-α,TNF-α)水平,取脊髓组织行HE染色,观察脊髓组织病理学改变。结果:与IR组相比,H200组大鼠后肢运动功能评分显著提高(P<0.05),H20组、H50组与IR组间运动功能评分差异无统计学意义。与IR组相比,HMGB1预处理组脊髓前角正常运动神经元计数增多,血清中TNF-α表达降低,其中H50组、H200组差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论:HMGB1预处理可以减轻大鼠脊髓组织病理学损伤,改善后肢运动功能障碍,对SCII具有保护作用。并且这种保护效应在一定范围具有剂量依赖性。第二部分:高迁移率族蛋白B1预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护机制研究目的:探讨高迁移率族蛋白B1预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护机制。方法:54只健康成年雄性SD大鼠,随机分为:假手术组(S组,18只),缺血再灌注损伤对照组(C组,18只)以及HMGB1预处理组(H组,18只)。于缺血前18h,H组经侧脑室注射200ng重组HMGB1,S组及C组经侧脑室给予等容量无菌生理盐水。Zivin改进法建立大鼠SCII模型,阻断腹主动脉45min后行再灌注。于再灌注6h、12h、24h各取6只大鼠,采集血液标本检测循环中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平,取脊髓组织检测核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)活性及其抑制蛋白(Inhibitor kappa B-α, IκB-α)含量。结果:再灌注各时间点,与S组比较,C组与H组血清中TNF-α、IL-6水平升高,脊髓组织中IκB-α降解明显,NF-kB活性增高。与C组比较,H组血清中TNF-α、IL-6水平降低,脊髓组织中IκB-α降解减少,NF-kB活性降低。结论:HMGB1预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与预处理减少IκB-α降解,抑制NF-κB活性,从而减轻炎性反应有关。
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