未定型鸭肝炎病毒单克隆抗体的制备及初步应用研究

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自1999年开始在中国北京、广东、广西等地接种过I型肝炎毒疫苗小鸭广泛暴发肝炎,其临床特征I型鸭肝炎类似,但应用I型鸭肝炎弱毒疫苗和高免卵黄抗体均无明显的防治效果.本研究通过对该病病原分离和血清学比较,初步确定病原为未定血清型鸭肝炎病毒.未定型鸭肝炎尿囊液毒经差速离心和不连续蔗糖/甘油密度梯度超速离心提纯后,免疫BALB/c小鼠.取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用建立完善的间接ELISA方法筛选.有限稀释三次克隆,获得一株该病毒的杂交瘤细胞株.经鉴定该株单抗为IgG<,1>亚类,该杂交瘤细胞的平均染色体为98条.细胞培养上清效价及腹水效价为1:20000和1:10<6>,与其它病原无交叉,抗体分泌稳定.以此单抗为基础初步建立了检测未定鸭病毒性肝炎的夹心ELIS方法.该方法特异性强、重复性好、敏感性高,是确诊鸭病毒性肝炎的一种快速、有效的方法.
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