鼠李糖乳杆菌上清液对感染后肠易激综合征大鼠5-羟色胺转运体表达调控的研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:armodmli
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目的:感染后肠易激综合征(Post-infectious Irritable Bowel Syndrome,PI-IBS)主要是由前期肠道感染而导致后期发展为IBS,临床表现类似于腹泻型肠易激综合征,以肠道持续低度炎症、内脏高敏感和肠道动力紊乱为特征。益生菌已被证实能够用于IBS临床治疗,能够有效的缓解IBS患者腹痛、腹泻等肠道症状,并缓解焦虑、抑郁等精神症状,有效提高患者生活质量。其中,鼠李糖乳杆菌GG菌株(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)属于乳酸杆菌属,是目前临床研究最为广泛的益生菌之一,存在于多种益生菌制剂中,在辅助治疗IBS中具有至关重要的作用。然而,其具体作用机制尚不明确。本研究的目的是利用空肠弯曲杆菌构建PI-IBS大鼠模型,给予不同浓度LGG上清液治疗,评估LGG上清液对大鼠肠道和脑组织5-羟色胺转运体(Serotonin Transporter,SERT)mRNA和蛋白表达水平的调控作用。方法:本实验首先构建PI-IBS动物模型,25只SD雄性大鼠予磷酸盐缓冲溶液(Phosphate Buffer Saline,PBS)2ml持续灌胃7天,作为对照组,85只大鼠予1010cfu/ml空肠弯曲杆菌菌悬液2ml持续灌胃7天,作为模型组;然后,通过监测大鼠一般状态、体重、粪便含水量和排菌情况,评估其是否进入感染后期;其次,对照组和模型组分别随机抽取大鼠进行肠道传输试验和腹壁撤退反射试验,检测大鼠肠道动力、内脏敏感性和肠道SERT表达水平,评价建模效果;最后,将大鼠重新分组,原对照组不变,命名为M组,予PBS溶液灌胃,模型组重新分为4组,A组予PBS溶液灌胃,B、C、D组分别予未稀释、2倍稀释、3倍稀释浓度的LGG上清液灌胃,每组大鼠均20只,每只每天灌胃2ml,共持续4周,每周每组处死5只,取结肠和脑组织,应用RT-PCR和Western-blot技术检测组织内SERT mRNA和SERT蛋白的表达水平变化。统计学分析应用SPSS22.0进行统计学分析:计量资料表示为均数±标准差,3组以上组间差异采用单因素方差分析,根据方差齐性分别采用LSD或Dunnett T3方法,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果:空肠弯曲杆菌感染急性期模型组体重显著下降,粪便湿重比明显增加,第70天进入感染后期;模型评估显示大鼠肠道传输速率加快,呈内脏高敏感状态,且结肠SERT蛋白表达水平显著降低;给予LGG上清液灌胃治疗后,B、C、D组结肠SERT mRNA和SERT蛋白表达量均高于A组。给予未稀释LGG上清液的B组PI-IBS大鼠灌胃2周后,SERT mRNA表达水平是M组的2.67倍(P=0.018),随着LGG上清液灌胃时间的增加,B组SERT mRNA表达量逐渐增加;给予2倍稀释LGG上清液灌胃治疗的C组对肠道SERT mRNA和SERT蛋白上调作用与B组相似;给予3倍稀释LGG上清液的D组,在灌胃第1周时表现显著上调作用,SERT mRNA表达量约是M组的6.9倍,但于灌胃2周后呈现骤降趋势,为M组的2.3倍。B、C、D组对肠道SERT蛋白上调作用较为平稳,在灌胃后第2周、3周均显著高于对照组,但三组组间差异较小,无统计学意义。不同稀释浓度的LGG上清液对脑组织SERT mRNA和SERT蛋白表达在整个灌胃刺激期间均无统计学差异。结论:空肠弯曲杆菌可以用来构建感染后肠易激综合征大鼠模型,在给予LGG上清液治疗后,大鼠肠道组织SERT mRNA和SERT蛋白表达显著增高,但大鼠脑组织SERT mRNA和SERT蛋白表达无明显差异。
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