木豆叶黄酮微波提取工艺及其抗氧化活性研究

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本文以木豆叶为原料,建立了高效、快速的微波辅助提取荭草苷和木犀草素的工艺,并对工艺参数进行系统优化。同时,对不同提取方法提取物及荭草苷和木犀草素的抗氧化活性进行了比较研究。研究结果如下:1.建立了荭草苷和木犀草素的RP-HPLC定量分析方法:色谱柱:HIQ sil C18W(5μm,250mm×4.6mm i.d.,5μm);流动相组成为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸甲醇溶液(B);洗脱梯度0~15min,33%~33%B:15~40min,33%~75%B;40~45min,75%~33%B;流速1mL/min柱温30℃;进样量10μL检测波长330nm(荭草苷)和254nm(木犀草素)。在此检测条件下,荭草苷和木犀草素分别在13.50-270.00和17.00~340.00μg/mL μg/mL的范围内线性关系良好,重现性和精密度R.S.D.均小于4.2%,加样回收率在98.16%-102.35%之间,R.S.D.均小于3.9%。2.建立了微波辅助提取木豆叶中荭草苷和木犀草素工艺,对影响提取率的各因素进行了考察,确定了最优微波辅助提取工艺参数:材料粒径:50目提取溶剂:乙醇浓度80%液固比:20mL/g提取温度:60℃提取次数:4次,提取时间:10min辐射功率:500W在上述优化条件下荭草苷和木犀草素的提取率分别为4.42±0.01mg/g和0.10±0.01mg/g。通过微波辅助提取技术与常规的热回流、超声辅助和浸泡提取技术相比较,可知微波辅助提取技术显著的提高木豆叶中荭草苷、木犀草素等黄酮类活性成分的提取率,同时极大的缩短了提取时间,显著的减少热敏性黄酮类活性成分长期处于高温条件下发生分解等现象,能够最大限度的保留了该活性成分的药效。3.研究了木豆叶提取物及荭草苷和木犀草素的抗氧化活性在检测的提取物样品中,微波提取物具有更好的抗氧化活性,其DPPH白山基清除实验的IC50为0.26mg/mL。在2mg/mL的浓度时,4种提取物的自由基清除率均达到80%以上。木犀草素具有很好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除实验的1C50为0.035mg/mL,比较接近于BHT的IC50值(0.014mg/mL)。
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