液滴荧光法在药物分析中的研究和应用

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第一章:本章对液滴技术的研究进展以及药物荧光分析法的研究进展进行了综述。  第二章:本章以葡聚糖凝胶作为固相基质,结合流动注射技术发展了一种新型的液滴荧光法并将其用于奎宁和盐酸普鲁卡因的快速检测。填充葡聚糖CMC-25微珠的离子交换柱用于奎宁和盐酸普鲁卡因的快速分离,基于二者均发射较强的内源荧光,采用液滴荧光法,结合固体基质流动注射分析法,对奎宁和盐酸普鲁卡因进行快速检测。实验结果表明,奎宁和盐酸普鲁卡因的线性范围分别在1.2×10-6~2.4×10-4g·L-1和1.2×10-5~2.4×10-3 g·L-1,线性回归方程分别为F=-2.92+2.50×106C和F=6.26+1.03×105C,相关系数分别为0.9995和0.9893,检出限分别为1.0×10-6 g·L-1和1.1×10-5 g·L-1。该方法具有较高的灵敏度与选择性以及较好的精密度和重复性。将所建立的方法用于奎宁和盐酸普鲁卡因注射液的测定,回收率在97%~102%,相对标准偏差小于2.5%。  第三章:本章采用液滴荧光法及紫外光谱法研究了生理pH值条件下水溶液体系中维生素B6与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。实验发现维生素B6对牛血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其猝灭类型为静态猝灭。求得不同温度下维生素B6与牛血清白蛋白的结合常数K,根据F(o)rster的偶极—偶极非辐射能量转移理论算出供体—受体的结合距离为2.72 nm。由Linewear-Burk方程求出不同温度下反应时复合物的形成常数KLB和结合位点数n及对应温度下结合反应的热力学参数,证明二者之间的作用力主要是氢键和范德华力。同时采用同步荧光分析技术,对蛋白质与药物结合时的构象变化进行了探讨。  第四章:本章采用紫外光谱法和液滴荧光法,在接近人体生理pH条件下,对核黄素和小牛胸腺DNA的相互作用机制进行了研究。通过盐效应、热变性、荧光猝灭等实验推断得出核黄素与DNA之间可能的作用方式是嵌入作用和静电结合。并根据Scatchard方程求得该反应的结合常数与结合位点数,说明二者具有较强的结合能力。
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