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马奶含有丰富的维生素和矿物质,营养价值极高,但其产量远低于牛奶。随着人民生活水平的提高,马奶的需求量增加,加强马泌乳遗传基础研究,开发相关的分子标记,培育乳用马品种势在必行。本研究选择了9个家畜泌乳性能候选基因:催乳素(PRL)及催乳素受体基因(PRLR)、垂体特异性转录因子1(POU1F1)、生长激素1(GH1)及生长激素受体基因(GHR)、乳铁蛋白基因(LTF)、雌激素受体基因(ESR1、ESR2)和三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因(ABCG2),根据NCBI提供的基因序列设计扩增CDS区序列,以3个中国家马品种(伊犁马、关中马和蒙古马)共337匹马为研究对象,测序检测鉴定候选基因CDS区的单核苷酸多态位点,采用PCR-RFLP技术对其进行分型,并将伊犁马上发现SNP位点与伊犁马日均产奶量进行单因素方差分析,获得如下研究结果:1.在3个中国家马品种9个泌乳相关基因中检测到10个SNPs(PRL c.210 C>T,PRL g.9115 T>G,PRL g.9119 C>A,PRL g.11090 A>G,PRLR g.145227 T>G,POU1F1g.2758 T>C,GH1 c.22 A>C,GH1 g.1584 C>G,GHR g.-562 C>T,LTF c.172 G>A),均为首次发现。其中PRLR g.145227 T>G,GHR g.-562 C>T,LTF c.172 G>A 3个位点仅发现于伊犁马上,PRL g.9115 T>G,PRL g.11090 A>G,GH1 c.22 A>C,GH1 g.1584 C>G4个位点仅发现于关中马上,PRL g.9119 C>A位点为关中马、蒙古马共有,PRL c.210C>T,POU1F1 g.2758 T>C位点在三个品种上均有发现。全部10个SNP多态位点中,有3个位点发生在基因的CDS区域,引起错义突变;1个位点发生在基因的启动子区域,其余6个位点均发生在内含子上。2.使用PCR-RFLP方法对伊犁马上检测到的SNP多态进行分型统计,并与其120天日均产奶量进行关联分析。检测到伊犁马上存在的5个不同基因的SNP位点中,PRL c.210 C>T和LTF c.172 G>A是发生在CDS区上的错义突变,PRL c.210 C>T突变导致PRL基因编码蛋白第70位苯丙氨酸突变为亮氨酸,LTF c.172 G>A突变致LTF编码蛋白第57位精氨酸突变为赖氨酸;GHR g.-562 C>T发生在GHR基因启动子区域,其余位点均位于内含子上。与日均产奶量的关联分析结果显示,5个不同基因的SNP位点中,除PRL c.210 C>T外,各位点不同基因型的日均产奶量差异不显著。PRL c.210 C>T位点不同基因型的日均产奶量差异显著,其中CC基因型个体日均产奶量显著高于CT基因型个体,CT基因型个体日均产奶量与TT基因型个体差异不显著,推测C等位基因可能对伊犁马产奶量性状有正遗传效应。3.使用双荧光素酶报告基因系统,检测马PRL、PRLR基因启动子活性区域。检测结果显示,马PRL基因上游-418~-1050bp区间为该基因的主要活性区域,其中-418~-738bp区间存在较强的顺势作用元件;马PRLR基因启动子活性区域位于上游-702~-2399bp区间,-1546~-1798bp区间存在较强的顺势作用元件。目前,中国家马品种泌乳性能相关基因的研究甚少。本研究初步调查了3个中国家马品种9个泌乳相关基因CDS区SNP情况,并将伊犁马上发现SNP位点与其日均产奶量进行关联分析,初步探索了马PRL、PRLR基因启动子活性区域,为中国乳用马的高效选育、种质资源保存与利用提供了一定的依据。