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扩张床吸附技术(EBA)是一种新型的生物分离技术,集固液分离、浓缩和初步纯化于一个单元操作之中,能直接从含有细胞和细胞碎片的发酵液或匀浆液中提取目标产物,而不必事先除去悬浮的固体颗粒。目前EBA主要用于活性蛋白、酶、单克隆抗体的分离纯化,对于天然产物的分离纯化的相关报道很少。大豆糖蜜是生产大豆浓缩蛋白过程中得到的副产品,其中含有大豆异黄酮,过去大豆糖蜜多用作牲畜的饲料。本文旨在通过悬浮聚合法制备一种聚甲基丙烯酸缩水甘油酯-钛白粉复合微球(PGMA-Ti02微球),作为扩张床介质。然后将β-环糊精(β-CD)直接固载到具有大量环氧活性功能基的PGMA-TiO2微球上,制备出新型的扩张床吸附剂(PGMA-TiO2-β-CD)最后,所制备的吸附剂被应用于从大豆糖蜜中分离纯化大豆异黄酮。本研究共分为三部分。第一部分主要考察了PGMA-TiO2复合扩张床介质的制备方法。通过优化,得出较佳的复合介质制备工艺条件为:水油比3:1;引发剂用量0.7%;交联剂用量38%;搅拌转速为300~350r/min。在此工艺条件下,详细考察了Ti02添加量对复合介质的基本性质的影响。仪器分析表明制备的PGMA-TiO2复合介质具有规则的球形外观、良好的基本性质和粒径分布,与商品化扩张床介质相近。第二部分探索了将β-CD直接固载到PGMA-TiO2复合介质微球上的方法,制备出新型的扩张床吸附剂(PGMA-TiO2-β-CD)。研究发现固载化反应在DMF/NaH体系中较易进行;优化后得出最佳制备工艺条件:β-CD与PGMA-TiO2微球投料比为1:1,反应温度70℃,反应时间19h。采用红外光谱和扫描电镜对PGMA-TiO2-β-CD吸附剂的结构进行了表征。扩张床性能研究表明在实验范围内,所制备的吸附剂在扩张床内的流动可以近似为平推流。最后将所开发的PGMA-TiO2-β-CD吸附剂应用于直接从大豆糖蜜中分离大豆异黄酮,得到了纯度为78.6%的大豆异黄酮,收率约为91%。较之于传统的提取工艺,扩张床吸附技术节省了大量的操作时间和生产成本,充分显示出其高效和集成化的特点。